Milyen mikroszkóppal lehet látni a mikrobasejtek alakját
Gyűjtőfogalom az összes apró organizmusra, amelyet az egyének szabad szemmel nehezen észlelnek. A mikroorganizmusok közé tartoznak a baktériumok, vírusok, gombák és néhány alga. (Egyes mikroorganizmusok azonban szabad szemmel is láthatók, például gombákhoz tartozó gombák, Ganoderma lucidum stb.) A vírusok a "nem sejtes organizmusok" egy fajtája, amelyek néhány komponensből, például nukleinsavakból és fehérjékből állnak, de a túlélésnek az élő sejtektől kell függnie. A létező különböző környezetek szerint feloszthatók prokarióta mikroorganizmusokra, űrmikroorganizmusokra, gombás mikroorganizmusokra, élesztő mikroorganizmusokra, tengeri mikroorganizmusokra stb.
A mikroorganizmusok szerepe és káros hatásai:
A mikroorganizmusok emberre gyakorolt egyik legfontosabb hatása a fertőző betegségek előfordulása. Az emberi betegségek 50 százalékát vírusok okozzák. Az emberi betegségeket okozó mikrobák története az emberi lények velük való folyamatos küzdelmének története. Az emberi lények jelentős előrehaladást értek el a betegségek megelőzésében és kezelésében, de továbbra is előfordulnak új és újra felbukkanó mikrobiális fertőzések, például számos vírusos betegség, amelyekből hiányoznak a hatékony terápiás gyógyszerek. Egyes betegségek patogén mechanizmusa nem tisztázott. A nagyszámú, széles spektrumú antibiotikummal való visszaélés erős szelekciós nyomást váltott ki, aminek következtében számos törzs mutálódik, ami gyógyszerrezisztencia kialakulásához vezet, és az emberi egészséget új veszélyek fenyegetik. Egyes szegmentált vírusok rekombináció vagy átrendeződés révén mutálódhatnak. A legjellemzőbb példa az influenzavírus.
A mikroorganizmusok konkrét definíciójának ismeretében milyen típusú mikroszkópot kell használnia a kísérletezőnek a mikroorganizmusok tanulmányozása során, hogy lásson, és milyen mikroszkóppal lehet jobban látni, illetve megfigyelni és elemezni a gyakori mikrobiális formákat.
A mikroszkóp találmánya az, hogy képes legyen meglátni a mosolygós tárgyakat, amelyek szabad szemmel nem láthatók. A mikroorganizmusok mérete nagyon kicsi, ezért nagyítani és mikroszkóp segítségével kell megfigyelni őket. Ezen kívül sokféle mikroorganizmus létezik, így alapvetően az optikai mikroszkópok többsége A mikroorganizmusok megfigyeléséhez a következő kérdés, hogy milyen típusú mikroszkópot érdemes használni a mikroorganizmusok megfigyelésére és elemzésére. A mikrobiális morfológiai megfigyelés általános mikroszkópjai közé tartoznak a biológiai mikroszkópok, a fáziskontraszt mikroszkópok, a fordított mikroszkópok, a fluoreszcens mikroszkópok és a konfokális mikroszkópok. Mikroszkóp és így tovább.
Az alábbiakban a mikroorganizmusok megfigyelésére használt különféle mikroszkópokat ismertetjük:
1. Közönséges fénymikroszkóp
Fényforrásként természetes fényt vagy fényt használnak, amelynek hullámhossza körülbelül {{0}},4 μm. A mikroszkóp felbontása a hullámhossz fele, azaz 0,2 μm, a legkisebb szabad szemmel látható kép pedig 0,2 mm. Ezért ha olajos (merítési) tükörrel 1000-szoros nagyítást használunk, a 0,2 μm-es részecskék szabad szemmel látható 0,2 mm-es méretre nőhetnek. A hagyományos optikai mikroszkópok használhatók baktériumok, aktinomyceták és gombák megfigyelésére.
2. A Darkfield mikroszkópot általában a festetlen mikrobiális morfológia és mozgás megfigyelésére használják. Miután a sötétmezős kondenzátort a közönséges mikroszkópba telepítették, a fény nem tud közvetlenül a közepéről behatolni, és a látómező sötét. Amikor a minta ferde fényt kap a kondenzátor pereméről, az szétszóródhat, így a sötét mező háttérben fényes mikroorganizmusok, például baktériumok vagy spirocheták figyelhetők meg.
3. Fáziskontraszt mikroszkóp A fáziskontraszt mikroszkóp a fáziskülönbség-lemez fényhatását használja a közvetlen fény fényfázisának és amplitúdójának megváltoztatására, valamint a fényfázis különbségének fényintenzitás-különbséggé alakítására. Fáziskontraszt mikroszkóp alatt, amikor a fény áthalad egy festetlen próbatesten, a fényfázis különbségét a minta különböző részeinek sűrűségének inkonzisztenciája okozza, és megfigyelhető a mikroorganizmusok morfológiája, belső szerkezete és mozgásmódja.
4. Fluoreszcens mikroszkóp A fluoreszcens mikroszkóp alapvetően megegyezik a hagyományos optikai mikroszkópéval, a fő különbség a fényforrás, a szűrő és a kondenzátor. Jelenleg a legtöbben epi-light eszközöket használnak, fényforrásként pedig általában nagynyomású higanylámpákat használnak, amelyek ultraibolya vagy kék-lila fényt bocsátanak ki. Kétféle szűrő létezik: gerjesztő szűrő és abszorpciós szűrő. Az általános világosmezős kondenzátorok mellett a sötétmezős kondenzátorok is használhatók fluoreszcens mikroszkópokban, amelyek kék fénnyel javítják a fluoreszcencia és a háttér közötti kontrasztot. Ez a módszer fluoreszcens pigmentekkel megfestett vagy fluoreszcens antitestekkel kombinált baktériumok kimutatására vagy azonosítására alkalmazható.
5. Az elektronmikroszkópok az elektronáramlást használják fényforrásként. A látható fénnyel összehasonlítva a hullámhossz több tízezerszeres, ami nagyban javítja a felbontást. A mágnestekercset optikai erősítő rendszerként használják, és a nagyítás elérheti a tízezer- vagy százezerszeresét. Gyakran használják vírusrészecskékben. valamint a bakteriális ultrastruktúra megfigyelése.
Festetlen mikrobiális minták megfigyelése:
A nem festett minták általában felhasználhatók a baktériumok morfológiájának, erejének és mozgásának megfigyelésére. A baktériumok színtelenek és átlátszóak, ha nem festődnek, és mikroszkóp alatt főként a baktériumok és a környező környezet törésmutatója közötti különbség alapján figyelhetők meg. A flagellákkal rendelkező baktériumok erőteljesen mozognak, míg a flagella nélküli baktériumok szabálytalan Brown-mozgást mutatnak. Az életképes baktériumok, mint például a Treponema pallidum, a Leptospira és a Campylobacter jellegzetes formájúak és mozgásmintázatúak, amelyek diagnosztikus jelentőséggel bírnak. Az általánosan használt módszerek a nyomásesési módszer, a függő csepp módszer és a kapilláris módszer.
1. Lógócsepp módszer Vigyen fel vazelint a tiszta homorú tárgylemez homorú furatára, vegyen egy oltóhurokkal ellátott baktériumszuszpenzió gyűrűt és helyezze a fedőüveg közepére, majd igazítsa a homorú üveglemez homorú furatát a a fedőüveg közepén lévő cseppet és Tegye rá a fedelet, majd gyorsan fordítsa meg, enyhén nyomja meg a fedőlemezt, hogy az szorosan tapadjon a vazelinhez a homorú lyuk szélén, majd figyelje meg nagy teljesítményű készülék alatt. mikroszkóp (vagy sötét mező).
2. Vegyünk egy oltóhurokkal ellátott baktériumszuszpenziós gyűrűt, és helyezzük egy tiszta üveglemez közepére nyomáscsökkentő módszerrel, majd óvatosan fedjük le a baktériumszuszpenziót fedőüveggel, ügyelve arra, hogy elkerüljük a légbuborékok képződését, és a baktériumszuszpenzió túlcsordulásától. Fényes (vagy sötétmezős) megfigyelés nagy teljesítményű objektív alatt.
3. A kapilláris módszert elsősorban az anaerob baktériumok kinetikájának vizsgálatára alkalmazzák. Általában 60~70mm hosszúságot válasszon. Miután az anaerob baktériumszuszpenziót egy 0.5-1,0 mm-es nyílású kapillárison keresztül szivatta, zárja le lánggal a kapilláris két végét. A kapillárist műanyag papírral rögzítettük az üveglemezre, és nagy teljesítményű lencse alatt, sötét mezőben figyeltük meg.
Megfestett mikrobiális minták megfigyelése mikroszkóppal:
A baktériumminta megfestése után a baktériumok és a környező környezet közötti éles színkontraszt miatt a baktériumok morfológiai jellemzői (például mérete, alakja, elrendezése stb.) a baktériumok és egyes speciális struktúrák tekintetében meghatározhatók. világosan megfigyelhető egy közönséges optikai mikroszkóp alatt (például kapszulák, flagellák, spórák stb.), és a baktériumok osztályozhatók és azonosíthatók a festési reaktivitás szerint.
(1) A bakteriális festés általános eljárása A bakteriális festés általános eljárása: kenet (szárítás)-fixálás-festés.
1. Kenet Vér, váladék, ürülék, szúrófolyadék és folyékony tenyészet készítése, valamint vékony filmkenetek közvetlen készítése üveglemezeken; boncolás vagy fertőzött állati szövetek, mintavételhez vattacsomóval kenjük be az elváltozást. Baktériumtelepek vagy gyepek szilárd táptalajon történő előkészítéséhez először egy oltóhurok segítségével vegyen ki egy gyűrűt normál sóoldatból, és helyezze a tárgylemez közepére, majd egy steril oltóhurokkal vegyen egy kis mennyiségű tenyészetet és őrölje meg. egyenletesen normál sóoldatban, és kenje fel 1 cm2-re Nagy vagy kicsi festett felületekre, hagyja szobahőmérsékleten természetes módon megszáradni, vagy távolról lassan száradjon.
2. A rögzítés célja a baktériumok elpusztítása, a bakteriális fehérje és szerkezet koagulálása, valamint a festés elősegítése; elősegíti, hogy a baktériumok megtapadjanak a tárgylemezen, nehogy mosás közben elmossák őket a víz; megváltoztatja a baktériumok festékanyag-áteresztő képességét, ami jótékony hatással van a festő baktériumsejtek szerkezetére. Általában lángos melegítéssel rögzítik, és a megszáradt kenetet gyorsan 3-szor átengedik a lángon. Jobb, ha nem égeti meg a bőrt a kézháton, amikor hozzáér a csúszdához.
3. Festés A különböző ellenőrzési céloknak megfelelően válasszon különböző festési módszereket a festéshez. Festéskor cseppenként adjuk hozzá a festékoldatot, hogy növeljük a fedést.
4. Maró Minden olyan anyagot, amely fokozza a festék és a festett tárgy közötti affinitást, rögzíti a festéket a festett tárgyon és megváltoztatja a sejtmembrán áteresztőképességét, maróanyagnak nevezzük. Általában a timsót, a csersavat, a fémsókat és a jódot stb. használják, és a melegítést is használják a színezés elősegítésére. A marószerek használhatók az elsődleges festés és az ellenfestés között, illetve fixálás után, illetve fixálóban és festésben is.
5. Színtelenítés Minden olyan vegyi anyagot, amely képes eltávolítani a festett tárgy színét, színtelenítőnek nevezzük. Színtelenítőként általában etanolt, acetont stb. használnak. A színtelenítő szer képes kimutatni a baktériumok és a színezékek kombinációjának stabilitásának mértékét, amely differenciális festéshez használható.
6. Ellenfestés Az elszíntelenedett baktériumokat vagy szerkezeteiket gyakran ellenfestékkel ellenfestik a könnyebb megfigyelés érdekében. Az ellenfestő oldat színe eltér az elsődleges festőoldat színétől, hogy éles kontrasztot képezzen. Az ellenfestés ne legyen túl erős, hogy ne takarja el a kezdeti festés színét.
