A lézeres konfokális mikroszkóp működési elve
A lézeres konfokális mikroszkóp működési elve
Az Olympus lézeres konfokális mikroszkóp egy olyan detektor, amely képes jeleket venni. Működési elve az, hogy egy pontszerű fényforrás egy kinagyított foltként, úgynevezett "levegős korongként" jelenik meg, miután áthaladt egy fluoreszcens mikroszkópon. Egy szabványos fehér fényű interferometrikus konfokális mikroszkópban a fókuszsíkon kívül kibocsátott fényt egy tűlyuk blokkolja, amelynek mérete meghatározza, hogy az Airy korong mekkora része juthat be a detektorba. Minél kisebb a tűlyuk, annál élesebb lesz a kép, és annál halványabb a kép, mivel a fény nagy része elvész. Minél kisebb a rekesznyílás, annál jobb a felbontás, de – ismét – annál nagyobb a fényjel elvesztése. Az Olympus lézeres konfokális mikroszkóp egyszerre tud színes CCD képet és lézeres pásztázó konfokális képet készíteni. Az Olympus konfokális lézermikroszkópok magasságmérésre képesek egy fényforrásból, egy mintából és egy detektorból álló konfokális beállításon keresztül. Ha a minta az objektívlencse fókuszsíkjában helyezkedik el, és a minta felületéről visszaverődő lézerfény a konfokális apertúrába fókuszál, a fotodetektor fogadja a jelet a mintától. Amikor a minta életlen helyzetben van, a konfokális rekesz nem fogadja a lézerjelet, így csak az éles jelet gyűjti a rendszer. Ezzel a funkcióval megvalósítható az Olympus lézerkonfokális mikroszkóp optikai metszeti funkciója.
A konfokális lézermikroszkópia előnyei
1. Lézerfényt használva fényforrásként, a megfelelő fluoreszcens szondák megjelölése után a mintát pontról pontra pásztázzák, hogy rétegről rétegre kétdimenziós optikai keresztmetszeti képeket kapjunk. "Sejt-CT" funkcióval rendelkezik, és számítógépes háromdimenziós rekonstrukciós szoftverrel támogatható háromdimenziós képek készítéséhez, amelyeket tetszőleges szögben elforgatva megfigyelhető a sejtek és szövetek háromdimenziós alakja és térbeli kapcsolata;
2. Képes élő sejteket és szöveteket károsodás nélkül megfigyelni, dinamikusan mérni az élő sejtek fiziológiai információit, mint a sejtek Ca ion koncentrációja és pH értéke;
3. Mérheti a sejtmembrán fluiditását, az intercelluláris kommunikációt, a sejtfúziót, a citoszkeleton rugalmasságát stb., és "könnyű késként" használható az intracelluláris "műtét" elvégzéséhez. Ez a technológia lehetővé teszi az élő sejtek és szövetek in situ dinamikus és kvantitatív megfigyelését és mérését.
