Mi a különbség a fluoreszcencia és a lézeres konfokális mikroszkópia között?
fluoreszcens mikroszkóp
1. A fluoreszcens mikroszkóp egy olyan eszköz, amely ultraibolya fényt használ fényforrásként a vizsgált tárgy megvilágítására, ami fluoreszcenciát bocsát ki, majd megfigyeli a tárgy alakját és helyzetét a mikroszkóp alatt. A fluoreszcens mikroszkóppal az anyagok sejten belüli abszorpcióját, szállítását, eloszlását és lokalizációját tanulmányozzák. A sejtekben lévő egyes anyagok, például a klorofill fluoreszcenciát bocsáthatnak ki, miután ultraibolya sugárzásnak vannak kitéve; Egyes anyagok önmagukban nem bocsátanak ki fluoreszcenciát, de ha fluoreszcens festékekkel vagy fluoreszcens antitestekkel festik meg őket, akkor ultraibolya sugárzás hatására is fluoreszcenciát bocsátanak ki. A fluoreszcens mikroszkópia ezen anyagok kvalitatív és kvantitatív kutatásának egyik eszköze.
2. A fluoreszcens mikroszkóp elve:
(A) Fényforrás: A fényforrás különböző hullámhosszúságú fényt bocsát ki (az ultraibolya sugárzástól az infravörösig).
(B) Gerjesztőszűrős fényforrás: Adott hullámhosszú fényt sugároz, amely fluoreszcenciát tud előidézni a mintában, miközben blokkolja a gerjesztő fluoreszcenciához haszontalan fényt.
(C) Fluoreszcens minták: általában fluoreszcens pigmentekkel festve.
(D) Blokkoló szűrő: szelektíven továbbítja a fluoreszcenciát azáltal, hogy blokkolja a gerjesztő fényt, amelyet a minta nem abszorbeált, és bizonyos hullámhosszak szelektíven sugároznak fluoreszcenciában is. Olyan mikroszkóp, amely ultraibolya fényt használ fényforrásként a besugárzott tárgy fluoreszcenciájának kibocsátására. Az elektronmikroszkópot először Knorr és Harroska állította össze Berlinben, Németországban 1931-ben. Ez a fajta mikroszkóp nagy sebességű elektronsugarat használ fénysugár helyett. Az elektronáramlás fényhullámokhoz képest jóval rövidebb hullámhossza miatt az elektronmikroszkóp nagyítása elérheti a 800000-szeresét, minimális felbontási határa 0,2 nanométer. A pásztázó elektronmikroszkóp, amelyet 1963-ban kezdtek el használni, lehetővé teszi az emberek számára, hogy lássák a tárgyak felületén lévő apró struktúrákat.
3. Alkalmazási kör: Kis tárgyak képeinek nagyítására szolgál. Általában biológia, orvostudomány, mikroszkopikus részecskék stb. megfigyelésére használják.
konfokális mikroszkóp
1. A konfokális mikroszkóp félig visszaverő lencsét ad a visszavert fény útjához, amely a lencsén már áthaladt visszavert fényt más irányba hajlítja. Van egy terelőlap, amelynek fókuszpontjában egy tűlyuk található, és a kis lyuk a fókuszpontban található. A terelőlap mögött egy fénysokszorozó cső található. Elképzelhető, hogy az érzékelési fény fókuszpontja előtt és után visszavert fény nem fókuszálható a kis lyukra ezen a konfokális rendszeren keresztül, és a terelőlemez blokkolja. Tehát a fotométer méri a visszavert fény intenzitását a fókuszpontban.
2. Alapelv: A hagyományos optikai mikroszkópok terepi fényforrásokat használnak, és a minta egyes pontjainak képét a szomszédos pontokból származó diffrakció vagy szórt fény befolyásolja; A lézeres pásztázó konfokális mikroszkóp lézersugarat használ, hogy egy megvilágított tűlyukon keresztül pontszerű fényforrást képezzen a minta fókuszsíkjának minden pontjának letapogatásához. A minta megvilágított pontja az érzékelési tűlyukon kerül leképezésre, és pontról pontra vagy vonalra fotosokszorozó cső (PMT) vagy termoelektromos csatolóeszköz (cCCD) fogadja a detektáló tűlyuk után, gyorsan fluoreszkáló képet képezve a számítógép monitorán. képernyő. A megvilágító tűlyuk és az érzékelési tűlyuk a tárgylencse fókuszsíkjához képest konjugálva van. A fókuszsíkon lévő pontok egyidejűleg fókuszálnak a megvilágítási lyukra és az emissziós tűlyukra, és a fókuszsíkon kívüli pontok nem jelennek meg az érzékelési tűlyukon. Ez egy konfokális képet eredményez, amely a minta optikai keresztmetszetét reprezentálja, és kiküszöböli a hagyományos mikroszkópiában az elmosódott képek hátrányát.
3. Alkalmazási területek: gyógyászat, állat- és növénykutatás, biokémia, bakteriológia, sejtbiológia, szövet- és embriótan, élelmiszertudomány, genetika, farmakológia, élettan, optika, patológia, botanika, idegtudomány, tengerbiológia, anyagtudomány, elektronikai tudomány, mechanika, kőolajgeológia és ásványtan.
