Fluoreszcens mikroszkóp használata: technikák és készségek
Fluoreszcens mikroszkóp műszaki paraméterei 1. Széles látószögű szemlencse 2. Akromatikus objektívlencse 3. Négylyukú objektívlencse konverter 4. Epi-fluoreszcens készülék Kék (B) Zöld (G) gerjesztő rendszer 100W higanylámpa 5. Koaxiális durva és finom fókusz beállító mechanizmus: beállítás Fókusztartomány: 15mm Mikromozgás rács értéke: 0,002mm 6. Kétrétegű mechanikus asztal Hosszirányú mozgási tartomány: 70mm Oldalirányú mozgási tartomány: 50mm
Használja a készségmódszert
(1) Csúszda
Az üveglemez vastagságának 0,8 és 1,2 mm között kell lennie. A túl vastag tárgylemez egyrészt több fényt nyel el, másrészt a gerjesztő fényt nem lehet a mintára koncentrálni. A tárgylemezeknek simának, egyenletes vastagságúnak és nyilvánvaló autofluoreszcenciától mentesnek kell lenniük. Néha kvarcüveg tárgylemezeket használnak.
(2) Takaróüveg
A fedőüveg vastagsága körülbelül 0,17 mm, sima. A gerjesztő fény erősítésére interferencia fedőüveg is használható, amely egy speciális fedőüveg, amely több réteg anyaggal (például magnézium-fluoriddal) van bevonva, amelyek különböző zavaró hatást fejtenek ki a különböző hullámhosszúságú fényre, ami a a fluoreszcencia simán megy. Izgalmas fény halad át és visszaverődik, és ez a visszavert gerjesztő fény gerjeszti a mintát.
(3) Példa
A szövetszeletek vagy más minták nem lehetnek túl vastagok. Ha túl vastag, akkor a gerjesztő fény nagy részét a minta alsó része fogyasztja el, míg az objektívlencse által közvetlenül megfigyelt felső rész nem lesz teljesen gerjesztve. Ezenkívül a cellák átfedése vagy a szennyeződés fedése befolyásolja az ítéletet.
(4) Rögzítőszer
Rögzítőszerként általában glicerint használnak, amelynek nem lehet autofluoreszcenciája, színtelen és átlátszó, a fluoreszcencia fényereje pedig világosabb pH 8.{1}},5-nél, és nem könnyű gyorsan elhalványulni. Ezért glicerin és 0,5 mol/l karbonát pufferoldat egyenlő arányú keveréke, amelynek pH-ja 90 és 9,5 között van, általában kötőanyagként használatos.
(5) tükörolaj
Általában, ha a mintákat sötét mező fluoreszcens mikroszkóppal és olajimmerziós lencsékkel vizsgálja, immerziós olajat kell használni. A legjobb, ha speciális, nem fluoreszkáló immerziós olajat használ. Helyette a fenti glicerin is használható, illetve folyékony paraffin is használható, de a törésmutatója alacsony, ami enyhén befolyásolja a képminőséget. Befolyás.
