Függőleges biofluoreszcencia mikroszkóp
A fluoreszcencia mikroszkópia elve egy rendkívül hatékony pontos forrás (például egy rendkívül nagy nyomású higanylámpa) használata egy bizonyos fényhullámhossznak (például ultraibolya fény 3650 λ vagy lila kék fény 4200 λ-rel), egy színszűrő rendszeren keresztül gerjesztő fényként, amely izzító fényben izzító fényt izgat. Ezután egy blokkoló (vagy elnyomó) szűrővel szűrjük az objektív lencse mögött, és a szemlencsének nagyító hatása révén figyeljük meg.
A blokkoló szűrőnek két funkciója van: először is elnyeli és blokkolja a gerjesztési fényt a szemlencsébe való belépéshez, hogy elkerülje a fluoreszcencia beavatkozását és a szem károsítását; A második az, hogy a specifikus fluoreszcencia áthaladjon és lehetővé tegye, hogy egy specifikus fluoreszcens színű legyen.
A fluoreszcencia mikroszkópok két típusra oszthatók, a fény útjának elve alapján:
1.
A régebbi fluoreszcencia mikroszkópok reflektorfényt használnak a fluoreszcencia gerjesztésére azáltal, hogy átadják a gerjesztő fényforrást a minta anyagán keresztül. Előnye az erős fluoreszcencia alacsony nagyítás mellett, de hátránya, hogy fluoreszcenciája a nagyítás növekedésével csökken. Tehát csak a nagyobb minták megfigyelésére alkalmas.
2. Esés fényfluoreszcencia mikroszkóp
A gerjesztő fény leesik az objektív lencséről a minta felületére, ugyanolyan objektív lencsével, mint a megvilágító kondenzátor és a fluoreszcencia gyűjtésének objektív lencséje.
Kettős színű gerenda -elosztót (dikroikus tükör) kell hozzáadni az optikai úthoz, amely 45 fokos szöget képez az optikai tengelygel. A gerjesztő fény tükröződik az objektív lencsébe, és a mintára összpontosít. A minta által generált fluoreszcencia, valamint az objektív lencse felületéről és a takaró üvegének tükröződött gerjesztő fénye egyszerre lép be az objektív lencsére, és visszatér a kettős színű gerenda -elosztóhoz, hogy elválasztja a gerjesztési fényt és a fluoreszcenciát. A maradék gerjesztési lámpát ezután a szűrő abszorpciója blokkolja. Ha a gerjesztő szűrők, a kettős színű sugár leválasztók és a blokkoló szűrők különböző kombinációit használják, akkor ezek kielégíthetik a különböző fluoreszcens reakciótermékek igényeit.
Ennek a fluoreszcencia mikroszkópnak az előnyei az egységes mező megvilágítás, a tiszta képalkotás és az erősebb fluoreszcencia nagyobb nagyítással.
