A fluoreszcens mikroszkópok alapelvei és szerkezeti jellemzői
A fluoreszcens mikroszkóp egy nagyon hatékony pontszerű fényforrást használ bizonyos hullámhosszú fény (például ultraibolya fény 3650 vagy lila kék fény 4200) kibocsátására egy színszűrő rendszeren keresztül gerjesztő fényként, amely gerjeszti a mintában lévő fluoreszcens anyagokat, hogy különböző színű fluoreszcenciát bocsássanak ki, majd az objektív lencséjén és a szemlencse nagyításán keresztül figyeli. Ily módon még erős háttérben gyenge fluoreszcenciával is könnyen felismerhető és nagy az érzékenysége. Főleg a sejtek szerkezetének, működésének és kémiai összetételének tanulmányozására használják. A fluoreszcens mikroszkóp alapszerkezete egy hagyományos optikai mikroszkópból és néhány kiegészítőből áll, például fluoreszcens fényforrásból, gerjesztőszűrőből, kettős színsugár-osztóból és blokkolószűrőből. A fluoreszkáló fényforrás - általában ultra-nagynyomású higanylámpákat (50-200 W) használ, amelyek különböző hullámhosszúságú fényt bocsátanak ki, de minden fluoreszkáló anyag rendelkezik egy gerjesztő fény hullámhosszával, amely a legerősebb fluoreszcenciát produkálja. Ezért gerjesztő szűrőket (általában ultraibolya, lila, kék és zöld gerjesztő szűrőket) kell hozzáadni, hogy csak bizonyos hullámhosszú gerjesztő fényt engedjenek át és besugározzák a mintát, miközben az összes többi fényt elnyelik. A gerjesztőfénnyel történő besugárzást követően minden anyag nagyon rövid idő alatt látható fluoreszcenciát bocsát ki, amelynek hullámhossza hosszabb, mint a besugárzási hullámhossz. A fluoreszcenciának van specifitása, és általában gyengébb, mint a gerjesztő fény. A specifikus fluoreszcencia megfigyeléséhez blokkoló (vagy elnyomó) szűrőt kell hozzáadni az objektívlencse mögé.
Feladata kettős: egyrészt elnyeli és blokkolja a gerjesztő fényt a szemlencsére, hogy elkerülje a zavaró fluoreszcenciát és a szem károsodását; másodszor, specifikus fluoreszcencia kiválasztása és áthaladásának engedélyezése, amely specifikus fluoreszcens színt mutat. Kétféle szűrőt kell kombinálni.
