A fluoreszcens mikroszkóp elve és szerkezeti jellemzői
A fluoreszcens mikroszkóp egy nagy fényhatékonyságú pontot használ bizonyos hullámhosszúságú fény kibocsátására (például ultraibolya fény 3650 hüvelyk vagy lila kék fény 4200 hüvelyk) a szűrőrendszeren keresztül gerjesztő fényként, hogy gerjeszti a mintában lévő fluoreszcens anyagokat, hogy fluoreszcenciát bocsássanak ki. különböző színek Ezt követően figyelje meg az objektívlencse és a szemlencse nagyításával. Ily módon erős kontrasztos háttér alatt, még akkor is, ha a fluoreszcencia nagyon gyenge, könnyen azonosítható és nagy érzékenységgel rendelkezik. Főleg a sejtszerkezet és -funkció, valamint a kémiai összetétel kutatására használják. A fluoreszcens mikroszkóp alapszerkezete egy közönséges optikai mikroszkópból és néhány kiegészítőből áll (például fluoreszcens fényforrás, gerjesztő szűrő, kétszínű nyalábosztó és blokkoló szűrő stb.). Fluoreszkáló fényforrás – általában ultranagy nyomású higanylámpát (50-200W) használnak, amely különböző hullámhosszúságú fényt bocsát ki, de mindegyik fluoreszcens anyagnak van egy gerjesztési hullámhossza, amely a legerősebb fluoreszcenciát produkálja, ezért egy gerjesztőszűrőt (Általában Léteznek ultraibolya, lila, kék és zöld gerjesztő szűrők), amelyek csak egy bizonyos hullámhosszú gerjesztő fényt engednek át és sugározzák be a mintát, miközben más fényt nyelnek el. Az egyes anyagok gerjesztőfénnyel történő besugárzása után nagyon rövid időn belül látható fluoreszcenciát bocsátanak ki a besugárzási hullámhossznál hosszabb hullámhosszal. A fluoreszcencia specifikus és általában gyengébb, mint a gerjesztő fény. A specifikus fluoreszcencia megfigyelése érdekében blokkolást (vagy elnyomást) kell hozzáadni az objektívlencse mögé, és azzal együtt kell használni.
A különbség a fluoreszcens mikroszkóp és a közönséges mikroszkóp között
1. A megvilágítási módszer általában episzkopikus, azaz a fényforrást az objektívlencsén keresztül vetítik a mintára;
2. A fényforrás ultraibolya fény, a hullámhossz rövidebb, és a felbontás nagyobb, mint a hagyományos mikroszkópoké;
3. Két speciális szűrő található, a fényforrás előtti a látható fény kiszűrésére szolgál, a szemlencse és az objektívlencse közötti pedig az ultraibolya sugarak kiszűrésére szolgál az emberi szem védelmére.
A fluoreszcens mikroszkóp egyfajta optikai mikroszkóp is, a fő különbség az, hogy a kettő gerjesztési hullámhossza eltérő. Ez határozza meg a fluoreszcens mikroszkóp és a hagyományos optikai mikroszkóp közötti különbséget a szerkezet és a felhasználás tekintetében.
A fluoreszcens mikroszkópia alapvető eszköz az immunfluoreszcens citokémiában. Olyan fő alkatrészekből áll, mint a fényforrás, a szűrőlemez rendszer és az optikai rendszer. Ez egy bizonyos hullámhosszú fény használata a minta gerjesztésére fluoreszcencia kibocsátására, és a minta fluoreszcens képének megfigyelése az objektívlencse és az okulárrendszer erősítésével.
