A fluoreszcens mikroszkóp elvei, jellemzői és alkalmazása
A fluoreszcens mikroszkóp elve és szerkezeti jellemzői: A fluoreszcens mikroszkóp nagy fényhatékonyságú pontszerű fényforrást használ, amely bizonyos hullámhosszú fényt bocsát ki (például 3650 hüvelykes ultraibolya fényt vagy 4200 hüvelykes ultraibolya kék fényt) egy színszűrő rendszeren keresztül. gerjesztő fény. A mintában lévő fluoreszcens anyagot gerjesztik, hogy különböző színű fluoreszcenciát bocsátanak ki, majd az objektív és az okulár nagyításával megfigyelhetők. Ily módon még gyenge fluoreszcenciával is könnyen felismerhető és erős kontrasztos hátterek mellett nagyon érzékeny, elsősorban sejtszerkezet és funkció, valamint kémiai összetétel vizsgálatára használják. A fluoreszcens mikroszkóp alapszerkezete egy közönséges optikai mikroszkópból és néhány kiegészítőből áll (például fluoreszcens fényforrás, gerjesztő szűrő, bikromatikus nyalábleválasztó és blokkoló szűrő stb.). Fluoreszkáló fényforrások – általában ultranagy nyomású higanylámpákat (50-200W) használnak, amelyek különböző hullámhosszúságú fényt bocsátanak ki. Mindazonáltal minden fluoreszcens anyagnak van egy gerjesztési fény hullámhossza, amely a legerősebb fluoreszcenciát produkálja, ezért gerjesztő szűrőket (általában ultraibolya, lila, kék és zöld gerjesztő szűrőket) kell hozzáadni ahhoz, hogy csak egy bizonyos hullámhosszú gerjesztő fény tudjon áthaladni és megvilágítani. a mintát, miközben elnyeli az összes többi fényt. A gerjesztett fénnyel történő besugárzást követően minden anyag nagyon rövid időn belül a besugárzásnál hosszabb hullámhosszú látható fluoreszcenciát bocsát ki. A fluoreszcenciának van specifitása, és általában gyengébb, mint a gerjesztő fény. A specifikus fluoreszcencia megfigyeléséhez blokkoló (vagy elnyomó) szűrőt kell hozzáadni az objektívlencse mögé.
Két funkciója van: egyrészt elnyeli és blokkolja a gerjesztő fényt a szemlencsébe, hogy elkerülje a fluoreszcenciát és a szem károsodását; másodszor, kiválasztja és átengedi a specifikus fluoreszcenciát, és egy adott fluoreszcencia színt jelenít meg. Mindkét típusú szűrőt ki kell választani az együttes használathoz.
