PH mérő - Közeg pH meghatározása és beállítása
Minden mikroorganizmusra hatással van annak a környezetnek a pH-értéke, amelyben él. A szelektív fajok jelenléte gyakran szűkíti azt a pH-tartományt, amelyben növekednek. Néha a tápközeg savassága vagy lúgossága növekedési szelekciós faktorként is működhet. A biokémiai tesztközegek esetében azonban az a pH-tartomány, amelyben a mikroorganizmusok tk-aktivitást mutatnak a szubsztrátumban, szűkebb, mint a növekedéshez szükséges pH-tartomány: ezért fontos a táptalaj pH-értékét az elvárt tartományba állítani. Amikor a laboratórium a táptalajt a táptalaj összetételének megfelelően készíti elő, ellenőrizni kell és be kell állítani a pH-t. Ki kell emelni, hogy a gyártó által biztosított kész szintetikus dehidratált tápközeg esetében is (különösen egyes törzsszárazok esetében) a kísérleti táptalaj elkészítése után meg kell mérni a végső pH-t.
A közeg pH-értékének mérésének legpontosabb módja a pH-mérő. Használat előtt kalibrálni kell ismert pH-jú standard pufferoldattal (általában pH 4-7). Öblítse le a pH-mérő elektródáját desztillált vízzel, és merítse a főzőpohárban lévő táptalajba, majd olvassa le a táptalaj pH-értékét a pH-mérő skálájáról. Minden gyártó részletes használati utasítást ad minden pH-mérő típushoz.
A táptalaj elkészítésekor a PH könnyen beállítható egy mechanikus keverésű pH-mérővel. A táptalajt folyamatosan keverhető edényben (például nagy főzőpohárban) kell elkészíteni. vagy teflonba burkolt mágnesek. Az agar tartalmú tápközeg pH-értékét a felengedés után be kell állítani, ami egy fűthető mágneses keverővel könnyen elvégezhető. A pH beállításakor először használjon ismert pH-jú standard pufferoldatot a pH-mérő kalibrálásához. Ezután tegye a kompozit elektródát és az ellenálláshőmérőt (ha van) a közegbe, lassan adjon hozzá megfelelő mennyiségű sósavat és nátrium-hidroxidot a főzőpohár végéről az elektródától távolabb, hogy a közeg elérje és fenntartsa a kívánt pH-t.
A pH-mérő hőmérséklet-kompenzációja során figyelembe kell venni a hőmérsékletnek az elektródarendszerre gyakorolt hatását: egyes hígításokban és közegekben a pH jelentősen változik a hőmérséklettel. Folyékony közegek és hígítások esetén a pH-értéket általában 25 fokon vagy azon a hőmérsékleten lehet beállítani és mérni, amelyen azokat használják.
Az agar táptalaj pH-ját feloldás után be kell állítani, és az oldódási hőmérséklet 45 fok feletti, ezért a szilárd táptalaj pH-ját a használati hőmérsékleten kell meghatározni. Ekkor laposfejű kompozit elektródát kell használni, és a pH-mérő hőmérséklet-kompenzációját kézzel kell kalibrálni. Ha a táptalaj elkészítésekor azt állapítják meg, hogy a táptalaj pH-értéke eltér az olvadáspont és a megszilárdulás között, az azt jelenti, hogy a pH beállítása hibás.
Hasonlóképpen, amikor az elkészített közeget hővel sterilizálják (pl. autoklávozzák), akkor pH-változások is bekövetkezhetnek. A dehidratált tápközegnél a gyártó ezt figyelembe vette, és általában nincs szükség a pH beállítására, de a felhasználandó tápközeg pH-ját gondosan ellenőrizni kell. Ha a dehidratált agar táptalaj pH-ját be kell állítani az újraoldás vagy az előkészítés során, a legjobb, ha a sterilizálási lépés után szűréssel sterilizált sósavval és nátrium-hidroxid oldattal állítjuk be, hogy elkerüljük a táptalaj túlmelegedését. Különböző alapanyagú tápközegek vagy gyógyszerek készítésekor az autoklávozás után ellenőrizni kell a táptalaj pH-értékét. Ezen túlmenően, ha azt tapasztaljuk, hogy a tápközeg pH-ja minden autokláv után ugyanannyira változik, a pH-t megfelelően be lehet állítani a táptalaj elkészítésekor. A sterilizálás után azonban még meg kell határozni a tápközeg végső pH-értékét.
