Mikrobamikroszkópos közvetlen számlálási módszer
Kísérleti lépések (mikrobiális mikroszkópos közvetlen számlálási módszer)
1. Hígítás
A sörélesztő szuszpenzióját megfelelően hígítsa fel. Ha a baktériumoldat nem tömény, akkor nem szükséges hígítani.
2. Mikroszkópos vizsgáló és számláló szoba
A minták hozzáadása előtt végezze el a számlálótábla számlálókamrájának mikroszkópos vizsgálatát. Ha szennyeződés van, számolás előtt meg kell tisztítani.
3. Adjon hozzá mintákat
Fedje le a tiszta és száraz vérsejtszámláló lemezt fedőüveggel, majd steril, finom szájú cseppentővel csepegtessen egy kis (nem túl sokat) hígított élesztőoldatot a fedőüveg széléről. Hagyja, hogy a bakteriális oldat a rés mentén a kapilláris áthatolással bejusson a számlálókamrába. Általában a számláló kamra megtölthető bakteriális oldattal. Ügyeljen arra, hogy ne képződjön buborék.
4. Mikroszkópos számlálás
5 perces pihentetés után helyezze a vérsejtszámláló táblát a mikroszkóp tárgyasztalára, először kis teljesítményű mikroszkóp segítségével keresse meg a számláló helyiség helyét, majd váltson át nagy teljesítményű mikroszkópra a számláláshoz. Ha a bakteriális oldatot túl vastagnak vagy túl hígnak találják a számlálás előtt, a hígítást újra be kell állítani a számlálás előtt. Az általános mintahígítási követelmény az, hogy kis sejtenként körülbelül 5-10 baktériumtestnek kell lennie. Válasszon ki 5 cellát minden számlálószobából (opcionális 4 sarok és középső cella) a számláláshoz. A rácsvonalon található micélium általában csak a felső és a jobb oldali vonalra számít. Ha az élesztő kihajt és a bimbó mérete eléri az anyasejt felét, akkor két baktériumszámlálást végzünk. A minta megszámlálásához a minta baktériumtartalmát a két számlálókamrából kapott értékek alapján kell kiszámítani.
5. Tisztítsa meg a vérsejtszámláló táblát
Használat után öblítse le a vérsejtszámláló táblát egy vízoszloppal a vízcsapon. Ne használjon kemény tárgyakat a mosáshoz. Mosás után szárítsa meg egyedül a levegőn, vagy szárítsa meg hajszárítóval. Mikroszkópos vizsgálat, figyelje meg, hogy vannak-e maradék baktériumtestek vagy egyéb csapadékok minden kis sejtben. Ha nem tiszta, többször meg kell mosni, amíg tiszta nem lesz.
