A filmek optikai és elektronmikroszkópos vizsgálatához szükséges minták előkészítési módszerei
A mikrofilmezési módszer általában négy kategóriát foglal magában: szeletelési módszer, teljes lezárási módszer, bevonási módszer és préselési módszer.
① Szelet módszer. Optikai mikroszkóp szelet vastagsága 2-25 mikron, általános növényi és állati anyagok, a szelet körülbelül 10 mikron vastagságú a megfelelő. A szekciózási módszer a különböző beágyazószerektől függően változik. Általánosan használt a paraffinos metszésmód, a pamutragasztós metszésmód, a fagyasztott metszésmód és a glikol-metakrilát módszer (a továbbiakban: GMA módszer). A paraffinos metszés módszer a rögzítés, beágyazás, metszés, festés, víztelenítés és lezárás lépéseit tartalmazza. A kulcs az, hogy a bioanyagot beágyazzuk paraffinviaszba, és a paraffinviaszt használjuk támaszként, hogy a viasztömbbe merített bioanyagot ideális vékony szeletekre vágjuk. A művelet menete a következő: rögzítés → vizes mosás → lépésről lépésre az alacsony koncentrációtól a magas alkoholos víztelenítésig → xilol átlátszóság → viasz merítés → beágyazás → szakaszolás → folt → xilol viaszmentesítés → lépésről lépésre a magastól az alacsony koncentrációig alkoholos kezelés, végül áttérés a vízre → festés → lépésről lépésre az alacsony koncentrációtól a magas alkoholos víztelenítésig → xilol átlátszóság → tömítés gyantaragasztóval. Az alapvető lépések minden filmkészítési technikánál ugyanazok.
② Integrált tömítési módszer. Egyedi sejtekhez, apró szervezetekhez vagy szétszórt szervekhez használható a teljes mounted film módszerrel. Ez a módszer különféle rögzítési, festési, víztelenítési, átlátszósági és tömítési lépéseket is igényel. Ezt a módszert fűzők és rovarok szájrészének elkészítésére használják.
Kenet módszer. Előkészítési módszer, amelynek során egy könnyen diszpergálható biológiai mintát vonnak be egy tárgylemezre. Példa erre a vérkenet.
④préselési módszer. A természetes, könnyen eloszló szövetek vagy a kezelés után könnyen eloszló szövetek, például állati spermatociták, gyökérvégsejtek stb. a tárgylemezen, plusz egy fedőlemez, majd a szöveteket erőteljesen összetörik, így a sejtek vagy intracelluláris struktúrák egy rétegben szétterülnek. a filmezési módszerekről. A préselési módszert gyakran használják a kromoszómák megfigyelésére, amelyek általában bíbor-acetáttal, zuzmóvörössel és karbolsavvörössel festettek.
