Bevezetés a többfoton lézeres pásztázó mikroszkóp előnyeibe és hátrányaiba
A többfoton lézeres pásztázó mikroszkóp előnyei:
1. Vörös fénnyel vagy infravörös fénnyel gerjesztve a fényszórás kicsi, a kis részecskék szóródása pedig fordítottan arányos a hullámhossz negyedik hatványával.
2. A képalkotó részről több szórt foton gyűjthető lyukak nélkül.
3. A tűlyuk nem tudja megkülönböztetni a fókuszon kívüli területről vagy a fókuszterületről kibocsátott szórt fotonokat, a mélyrétegekben végzett többfotonos képalkotás jel-zaj aránya jó.
4. Az egyfotonos gerjesztéshez használt ultraibolya vagy látható fényt a minta könnyen elnyeli és gyengíti, mielőtt a nyaláb elérné a fókuszsíkot, és nem könnyű a mély rétegeket gerjeszteni.
5. A biológiai mikroszkópos megfigyelésnél az első szempont, hogy magának a szervezetnek az aktív állapotát ne károsítsuk, illetve a víz, az ionkoncentráció, az oxigén és a tápanyagok keringését fenntartsuk. Fénymegfigyelés esetén mind a hő-, mind a fotonenergiának a besugárzási mennyiségen és a fényenergián belül kell maradnia, amely nem károsítja a sejteket.
6. A többfoton mikroszkópiának számos előnye van. Mint például a háromdimenziós felbontás, a mély behatolás, a szórási hatékonyság, a háttérfény, a jel-zaj arány, a vezérlés stb., mind rendelkeznek olyan jellemzőkkel, amelyekkel a korábbi lézermikroszkópok nem rendelkeztek, vagy nem tudtak felülmúlni.
A többfoton lézeres pásztázó mikroszkópia hátrányai:
1. Csak fluoreszcens képalkotáshoz.
2. Ha a minta olyan kromoforokat tartalmaz, amelyek elnyelik a gerjesztő fényt, a minta termikusan károsodhat.
3. A felbontás kissé csökkent. Bár a konfokális apertúra egyidejű használatával javítható, a jel elveszik.
4. A drága ultragyors lézerek korlátozottsága miatt a többfoton pásztázó mikroszkóp költsége viszonylag magas.
