A lézeres pásztázó többfoton mikroszkóp továbbfejlesztett előnyei
A lézeres pásztázó multifoton mikroszkóp az optikai mikroszkóp egyik fontos továbbfejlesztése, amely elsősorban azt mutatja, hogy képes megfigyelni az élő sejtek, fixált sejtek és szövetek mélyszerkezetét, valamint tiszta és éles többrétegű Z-sík szerkezetet, azaz optikai szeleteket kaphat. , amellyel a próbatestek háromdimenziós szilárd szerkezete megszerkeszthető. A konfokális mikroszkóp lézeres fényforrást használ, amely kitágítás után kitölti az objektívlencse teljes hátsó fókuszsíkját, majd áthalad az objektív lencserendszerén, hogy a minta fókuszsíkján nagyon kis pontokba konvergáljon. Az objektívlencse numerikus rekeszértéke szerint a legfényesebb megvilágítási pont átmérője körülbelül 0,25 ~ 0,8 μm, a mélysége pedig körülbelül 0,5 ~ 1,5 μm .. A kopolimerizációs fókusz mérete a mikroszkóp kialakításától, a lézer hullámhosszától, az objektívlencse jellemzőitől, a pásztázási egység állapotának beállításától és a minta tulajdonságaitól függ. A mikroszkóp megvilágítási tartománya és mélységélessége nagyon nagy, míg a konfokális mikroszkóp megvilágítása a fókuszsíkon található * * fókuszra koncentrálódik. A konfokális mikroszkóp legalapvetőbb előnye, hogy vastag fluoreszcens mintákból finom optikai szeleteket tud készíteni (amelyek elérhetik az 50 μm-t vagy még többet is), a szeletek vastagsága pedig körülbelül 0,5-1,5 μm. Optikai szeletképek sorozata készíthető a minta fel-le mozgatásával a mikroszkóp Z tengelyű léptetőmotorjával. A képinformáció megszerzését az első síkban vezérlik, és a minta más helyeiről érkező jelek nem zavarják. A háttérfluoreszcencia hatásának megszüntetése és a jel-zaj arány növelése után a konfokális kép kontrasztja és felbontása nyilvánvalóan javul a hagyományos térvilágítású fluoreszcencia képhez képest. Sok példányban sok bonyolult szerkezeti komponens összefonódik egy komplex rendszerré, de miután elegendő optikai metszetet sikerült összegyűjteni, szoftverrel három dimenzióban rekonstruálhatjuk. Ezt a kísérleti módszert széles körben alkalmazzák a biológiai kutatásokban a sejtek vagy szövetek közötti összetett szerkezeti és funkcionális kapcsolat tisztázására.
