Megértette valaha a fáziskontraszt mikroszkópia alapelveit?
A fáziskontraszt mikroszkópot Zernike holland tudós találta fel 1935-ben festetlen minták megfigyelésére. Élő sejteknél és festetlen biológiai mintáknál az egyes sejtrészek mikroszerkezetének törésmutatójának és vastagságának különbsége miatt a fényhullám áthaladásakor a hullámhossz és az amplitúdó nem változik, csak a fázis változik (amplitúdó különbség ), amely az emberi szem számára láthatatlan. megfigyelni. A fáziskontraszt mikroszkóp megváltoztatja a fáziskülönbséget, és fénydiffrakciós és interferencia-jelenségeket használ a fáziskülönbség amplitúdó-különbséggé változtatásához, hogy élő sejteket és festetlen mintákat figyeljen meg. A fáziskontraszt mikroszkóp és a közönséges mikroszkóp közötti különbség az, hogy a változtatható membrán helyett gyűrű alakú membránt használnak, a szokásos objektívlencse helyett fázislemezes objektívet használnak, és a koaxialitás érdekében teleszkópot használnak.
A fáziskontraszt mikroszkópia alapelvei:
A tárgy különböző szerkezeti elemei közötti törésmutató és vastagság különbségét felhasználva a tárgy különböző részein áthaladó optikai útkülönbség amplitúdó-különbséggé (fényintenzitás) alakul át, majd a gyűrű alakú membránnal ellátott kondenzátorlencsén keresztül a fáziskülönbség fázislemezzel Az objektívlencse a megfigyelő mikroszkópot valósítja meg. Főleg élő sejtek vagy festetlen szövetmetszetek megfigyelésére szolgál, esetenként pedig kontraszt nélküli, festett minták megfigyelésére is használható.
A mintán áthaladó látható fény optikai útkülönbsége amplitúdó-különbséggé változik, ezáltal javul a kontraszt a különböző struktúrák között, és jól láthatóvá válik a különböző struktúrák. A fény a mintán való áthaladás után megtörik, eltér az eredeti optikai úttól, és 1/4λ-val (hullámhossz) késik. Ha 1/4λ-al növeljük vagy csökkentjük, az optikai útkülönbség 1/2λ lesz, és a két nyaláb interferál a fénytengely után Erősítse, növelje vagy csökkentse az amplitúdót, javítsa a kontrasztot.
A fáziskontraszt mikroszkópnak két olyan funkciója van, amellyel más mikroszkópok nem rendelkeznek: ① elválasztja a közvetlen fényt (háttérfényt a látómezőben) a tárgy által elhajló fénytől; ② a hullámhossz körülbelül felét eltávolítja a fázisból, így nem tud kölcsönhatásba lépni, ami intenzitásváltozást eredményez.
