A fluoreszcens mikroszkópok optikai útjuk szerint két típusra oszthatók:
1. Transzmissziós fluoreszcenciás mikroszkóp: A gerjesztő fényforrást a fluoreszcencia gerjesztésére használják úgy, hogy a mintaanyagon áthaladnak egy kondenzátorlencsén. Az általánosan használt sötétmezős koncentrátorok is használhatók, a hagyományos koncentrátorok pedig a reflektor beállítására használhatók, hogy a gerjesztő fényt a mintára irányítsák és oldalra tereljék. Ez egy viszonylag régimódi fluoreszcens mikroszkóp. Előnye az erős fluoreszcencia kis nagyításnál, hátránya viszont, hogy a fluoreszcenciája a nagyítás növelésével csökken. Ezért jobb nagyobb mintaanyagok megfigyelésére.
2. A zuhanófényes fluoreszcens mikroszkóp a modern időkben kifejlesztett új típusú fluoreszcens mikroszkóp. A fentiektől eltérően a gerjesztő fény az objektívből lefelé esik a próbatest felületére, ugyanazt az objektívlencsét használva, mint a megvilágítási kondenzátor és a fluoreszcencia gyűjtésére szolgáló objektív. Egy kétszínű sugárnyaláb osztót kell hozzáadni az optikai úthoz, amely 45 fokban van a könnyű urántól. Szög, a gerjesztő fény visszaverődik az objektív lencséjébe, és a mintára fókuszál. A minta által generált fluoreszcencia, valamint az objektívlencse és a fedőüveg felületéről visszaverődő gerjesztő fény bejut az objektívbe, és visszatér a kettős színsugár-osztóba, elválasztva a gerjesztő fényt és a fluoreszcenciát. A maradék gerjesztő fényt ezután elnyeli a blokkoló szűrő. Ha a gerjesztő szűrők/kettős színsugaras szeparátorok/blokkoló szűrők különböző kombinációit alkalmazzák, ezek kielégíthetik a különböző fluoreszcens reakciótermékek igényeit. Ennek a fluoreszcens mikroszkópnak az előnyei az egyenletes térmegvilágítás, a tiszta képalkotás és az erősebb fluoreszcencia nagyobb nagyítás mellett.
Útmutató a fluoreszcens mikroszkóp használatához
1. Kapcsolja be a fényforrást. Az ultranagy nyomású higanylámpát néhány percig elő kell melegíteni, hogy elérje maximális fényerejét.
2. A transzmissziós fluoreszcenciás mikroszkópiához a szükséges gerjesztőszűrő beépítése szükséges a lámpaforrás és a kondenzátor közé,
és a megfelelő blokkoló szűrőt az objektívlencse mögött. A zuhanófényes fluoreszcens mikroszkópnak be kell helyeznie a szükséges gerjesztőszűrőt/kettős színsugár-osztót/blokkoló szűrőblokkot az optikai út nyílásába.
3. Figyelje meg kis teljesítményű mikroszkóppal, és állítsa be a fényforrás középpontját a különböző típusú fluoreszcens mikroszkópok beállító eszközének megfelelően úgy, hogy az a teljes megvilágítási pont közepén legyen.
4. Helyezze el a mintát, és fókuszálja a megfigyeléshez. Használat közben figyelni kell: A szűrő felszerelése előtt ne figyelje közvetlenül a szemével, hogy elkerülje a szemkárosodást; A minták olajmikroszkóppal történő megfigyelésekor speciális, nem fluoreszcens olajmikroszkópot kell használni; A nagynyomású higanylámpa kikapcsolása után nem lehet azonnal visszakapcsolni. 5 percet vesz igénybe az újraindítás, különben instabil lesz, és befolyásolja a higanylámpa élettartamát.
Fluoreszcens mikroszkóp alatt, kék ibolya fényszűrőt használó oktatási platformon megfigyelve a 0,01% akridin narancssárga fluoreszcens festékkel megfestett sejtek láthatók. A sejtmagot és a citoplazmát gerjesztik, hogy a fluoreszcenciát két különböző színű (sötétzöld és narancsvörös) hozzon létre.
