Mikroorganizmusok közvetlen számlálási módszere mikroszkóp alatt
A hemocitométerrel végzett közvetlen mikroszkópos számlálás a mikrobiális számlálás általános módszere. Ez a módszer intuitív kezelést és gyors észlelést kínál. Megfelelően hígított baktériumszuszpenziót (vagy spóraszuszpenziót) adunk a számlálókamrába a hemocitométer tárgylemeze és fedőlemeze közé a mikroszkópos számlálás céljából. Mivel a számlálókamra térfogata rögzített (0,1 mm³), az egységnyi térfogatra jutó mikroorganizmusok összlétszáma a mikroszkóp alatt megfigyelt mikrobaszám alapján számítható ki. Mivel ez a módszer élő és elhalt mikrobiális sejteket is számol, ezért teljes baktériumszámlálónak is nevezik.
A hemocitométer egy speciálisan kialakított üveglemez, amelynek négy hornya három platformot alkot. A középső platformot egy rövid keresztirányú horony tovább osztja két félre. A középső platform mindkét felére rácsminta van gravírozva, és mindegyik rács kilenc nagy négyzetből áll. A központi nagy tér számlálókamraként szolgál, ahol a mikrobaszámlálást végzik. A hemocitométer szerkezete a Ⅷ-1. ábrán látható.
Általában két előírás létezik a számlálókamrák beosztására. Az első típusnál egy nagy négyzet 16 közepes négyzetre van osztva, és minden közepes négyzet további 25 kis négyzetre (Ⅷ-2. ábra). A második típusban egy nagy négyzet 25 közepes négyzetre van felosztva, és minden közepes négyzet 16 kis négyzetet tartalmaz (Ⅷ-1, C ábra). A specifikációtól függetlenül az egy nagy négyzetben lévő kis négyzetek száma állandó marad: 16 × 25=400 kis négyzet, amint az a Ⅷ-2. ábrán látható.
Minden nagy négyzet oldalhossza 1 mm, ami 1 mm² területet biztosít. A fedőlemezzel való lefedés után a csúszda és a
fedőlemez 0,1 mm; ezért a számlálókamra térfogata 0,1 mm³.
A számlálás során általában először az öt közepes négyzetben lévő baktériumok teljes számát számolják meg. Egyetlen tápközeg-négyzet átlagos számát kiszámítjuk, majd megszorozzuk 16-tal vagy 25-tel, hogy megkapjuk a teljes baktériumszámot egy nagy négyzetben. Végül a baktériumszuszpenzió milliliterenkénti teljes mikrobaszáma ennek megfelelően átszámítható.
