Milyen mintaspecifikációk szükségesek a fénymikroszkópiához?
Az optikai mikroszkóp minta-előkészítési folyamatában a minta szeletvastagsága 2-25um; az elektronmikroszkóp szeletvastagsága 50-100 nm-en belül van (kivéve a nagyfeszültségű elektronmikroszkópot, amelynek mintavastagsága elérheti az 1 um-t), így az alkalmazott szeletmódszer nem egyforma.
A hordozót tekintve az optikai mikroszkóp metszet hordozója a tárgylemez, míg az elektronmikroszkóp metszet hordozója a rács.
Rögzítés szempontjából az optikai mikroszkóp szeleteit összetett fixálóval, míg az elektronmikroszkóp szeleteit egyetlen fixálóval ismételten rögzítjük.
A festés szempontjából az optikai minták festése viszonylag egyszerű. Különböző megfigyelési minták és optikai mikroszkóp típusok szerint általában elegendő valamilyen fix festőszerrel festeni. Számos és bonyolult módszer létezik az elektronmikroszkópos minták újrafestésére, mint például negatív festés, ezüstfestés stb.
A beágyazás szempontjából paraffint, kollódiumot, zselatint stb. használnak beágyazóanyagként az optikai mikroszkóp metszeteihez; epoxigyantát, polisztirol gyantát, izobutilén gyantát és vízoldható gyantát használnak beágyazószerként az elektronmikroszkóp metszetekhez.
Annak érdekében, hogy a mikroszkóp látómezeje egyenletesen és teljes mértékben meg legyen világítva, a megvilágítás optikai rendszerét a mikroszkóp első telepítésekor és hibakereséskor be kell állítani. Ez a mikroszkóp helyes használatának és a helyes és megbízható eredmények elérésének fontos eszköze és legalapvetőbb módja. követelményeknek. Ezenkívül a mikroszkóp használata során a fényforrás izzójának cseréje után szükséges lépés a megvilágítás optikai útrendszer beállításának megfelelő elsajátítása, valamint a mikroszkóp teljesítményének napi rendszeres ellenőrzése is. használat. A mikroszkóp megvilágításának optikai útrendszerének beállítása főként a következő négy elemből áll: 1. A fényforrás lámpakamrájának előzetes beállítása a mikroszkópon kívül ① Először nyissa ki a lámpakamra burkolatát, nyomja meg a rugós kapcsot, hogy a halogén izzót a a foglalatba, és a beszerelés során kerülje az ujjaival való közvetlen érintkezést az izzóval (puha ruhával vagy papírral elválasztható), hogy elkerülje Ujjlenyomatok és egyéb szennyeződések az izzón, ami befolyásolja az izzó élettartamát. ②Tegye a lámpaházat az asztalra, a tápellátás bekapcsolása után egy speciális csavarhúzóval állítsa be a lámpa élességállító gombjának furatát ("←→" jelzéssel), hogy az izzószál a falra vetüljön 1-2 m távolságra, és az izzószál képe korrigálásra kerül. Ezután állítsa be a lámpa magasságát, és állítsa be a menetfuratot ("──" jelzéssel), hogy az izzószál megfelelő pozícióba kerüljön; majd állítsa be a lámpa bal és jobb helyzetét a csavarlyuk beállításához ("──" jelzéssel), hogy az izzószál bal és jobb helyzete megfelelő legyen.
2. A mikroszkópban a fényforrás megvilágító eleme (izzószál) helyzetének ellenőrzésének és korrigálásának az a célja, hogy a világítótest képvégét egyenesen az objektívlencse látómezejébe igazítsa, és biztosítsa, hogy a fényforrás látómezeje a mikroszkóp a fényforrás szemszögéből teljesen és egyenletesen megvilágított. Világítás, amely a Kuhler világítási rendszer beállításának előfeltétele. Szükséges alapvető eszközök: A központosító teleszkóp a mikroszkóp vásárlásakor fel van szerelve. ① Húzza ki a mattüveg hüvelyt a lámpaházból, és helyezze vissza a lámpaházat a mikroszkópra. ② Válasszon egy 10×-es objektívlencsét, kapcsolja be a fényforrás programot a minta megkereséséhez és éles fókuszálásához, majd használjon 40×-es objektívlencsét a minta éles fókuszálásához (40×-es objektív Az izzószál teljes képe látható ); ③ Nyissa ki maximálisra a kondenzátor rekeszmembránját és membránját; ④ Húzza ki az egyik okulárt, cserélje ki központosító teleszkóppal, fogja meg a fehér részt, a másik kezével feszítse ki a fekete okulárt. Láthatja az izzószál képét a látómezőben; ⑤ Ha az izzószál helyzete nem megfelelő, állítsa be a "──" lyukat az izzószál képének vízszintes irányú beállításához, és a "──" lyukkal állítsa be az izzószál képét függőleges irányban, amíg az Izzószál képének beállítása a könnyű kör alakú képhez, amely éppen kitölti az objektívlencse apertúráját; ⑥ A beállítás után helyezze vissza a mattüveg hüvelyt az eredeti helyzetébe, húzza ki a központosító teleszkópot, és helyezze vissza a szemlencsét a következő beállításhoz. A mikroszkópon kívüli megvilágító fényforrás lámpakamrájának fent említett beállítását és a fényforrás világítótestének mikroszkópon belüli helyzetének ellenőrzését csak a mikroszkóp első beszerelésekor és hibakereséskor, valamint az izzó cseréjekor kell elvégezni. , és a mikroszkóp használata során nem lehet véletlenszerűen beállítani. Zavar esetén a fenti lépések szerint visszaállítható az eredeti állapotba.
3. A Kohler megvilágítási rendszer helyes beállítása A mikroszkóp helyes beállításának egyik fő feladata a megvilágítási optikai útrendszer beállítása, kulcsa pedig a Kohler megvilágítási rendszer beállítása. Minden személynek, aki mikroszkópot használ, különösen azoknak, akik mikrofényképeket készítenek, bizonyos mértékben meg kell érteniük és elsajátítaniuk a Kuhler megvilágítási rendszer alapelvét és beállítási lépéseit annak érdekében, hogy a mikroszkóp funkcióit teljes mértékben kihasználhassák és képeket készíthessenek. A megjelenő fotók következetesebbek és tökéletesebbek lehetnek. A Kohler megvilágító rendszer elve egyszerű: a fényforrás világítótestének bármely pontja által kibocsátott fény megvilágítja a mikroszkóp látóterét, és a fényforrás megvilágítóján lévő egyes pontok által kibocsátott fény összegyűjtésre kerül, és a mezőben. a mikroszkóp nézete Nagyon teljes és egyenletes megvilágítás érhető el. A Kuhler világítási rendszer beállításának célja, hogy egyenletes és elegendő megvilágítást biztosítson a megfigyelt látómezőhöz, és megakadályozza, hogy a szórt fény befolyásolja vagy zavarja a képalkotó rendszert, hogy elkerülje a film párásodását a fényképezés során. A nagy beszabályozású Kohler világítási rendszerhez szükséges alkatrészek: terepi membrán, tengelyre állítható kondenzátorlencserendszer. ① Válasszon 10× objektívlencsét és 10× szemlencsét. ② Helyezze a kondenzátor elülső lencséjét az optikai pályára, állítsa a rekeszmembránt közepes helyzetbe (nem túl nagy vagy kicsi), majd emelje fel a kondenzort felső helyzetbe, és állítsa a kondenzátor forgótányérját Fényes mező "J" helyzetbe ③ Állítsa a membránt minimumra (0,1)
④ Helyezze a lezárt biológiai mintát a színpadra, kapcsolja be a fényforrást, és élesen fókuszáljon
⑤ A látómezőben egy részben megvilágított terület vagy fényes folt lesz, amely a membrán elmosódott képe, amelyen a minta részletei jól láthatók; kívül van egy sötétebb látómező, ami nem feltétlenül lásd tisztán a minta részleteit
⑥ Enyhén állítsa lefelé a kondenzátort, hogy a látómezőben lévő fényes folt fokozatosan csökkenjen, és fokozatosan tiszta sokszögű képpé váljon, amely a mező membránjának tiszta képe;
⑦Általában a sokszögű kép nem a látómező közepén van, és be kell állítani a kondenzátor egy pár központosító csavarját, hogy a membrán sokszögű képét a középső helyzetbe állítsa;
⑧Fokozatosan nyissa ki a látómező membránját, hogy a sokszög kép a látómező beírt sokszögévé váljon, és ellenőrizze tovább az igazítás állapotát. Ha az igazítás nem ideális, folytassa a beállító csavar finomhangolását;
⑨Nyissa ki kissé a látómező membránját, hogy a sokszögű képe éppen eltűnjön a látómező szélén. Eddig a Kohler világítási rendszer beállítása fejeződött be. A Kohler világítási rendszer beállítása után a teljes látómező egyenletesen megvilágított, és a készített mikrofelvételek világosak és tiszták, normál kontraszt mellett.
