Melyek az optikai mikroszkópok általánosan használt megfigyelési módszerei
Az optikai mikroszkóp egy olyan optikai műszer, amely fényt használ fényforrásként a szabad szemmel láthatatlan apró struktúrák felnagyításához és megfigyeléséhez* A korai mikroszkópokat látszerészek gyártották 1604-ben.
Az elmúlt húsz évben a tudósok felfedezték, hogy az optikai mikroszkópok segítségével olyan tárgyakat lehet észlelni, nyomon követni és leképezni, amelyek kisebbek, mint a hagyományos látható fény hullámhosszának fele, vagy több száz nanométer.
Tekintettel arra, hogy az optikai mikroszkópokat hagyományosan nem használták a nanoskálák tanulmányozására, gyakran hiányzik belőlük a kalibrálási összehasonlítás a standardokkal annak ellenőrzésére, hogy az eredmények helyesek-e, és hogy az adott skálán pontos információkat kapjanak. A mikroszkópok pontosan és következetesen jelzik az egyes molekulák vagy nanorészecskék azonos helyzetét. Ugyanakkor nagyon pontatlan is lehet, mivel a mikroszkóp által azonosított objektum helyzete a milliárdod méteren belül valójában a méter egy milliomod része is lehet, hiszen nincsenek hibák.
Az optikai mikroszkópok gyakoriak a laboratóriumi műszerekben, és könnyen felnagyíthatnak különböző mintákat, a kényes biológiai mintáktól az elektromos és mechanikai berendezésekig. Hasonlóképpen, az optikai mikroszkópok egyre hatékonyabbak és költséghatékonyabbak, mivel egyesítik a világítás és a kamerák tudományos változatait az okostelefonokban.
Általános megfigyelési módszerek optikai mikroszkópokhoz
Differenciális interferencia (DIC) megfigyelési módszer
elv
Egy speciálisan kialakított prizma segítségével a polarizált fény egyenlő intenzitású és egymásra merőleges nyalábokra bomlik. A nyalábok nagyon közeli (a mikroszkóp felbontásánál kisebb) pontokon haladnak át az objektumon, ami enyhe fáziskülönbséget eredményez, háromdimenziós érzetet adva a képnek.
jellegzetes
A vizsgált tárgy háromdimenziós érzetet kelthet, és intuitívabban figyelheti meg a hatást. Nincs szükség speciális objektívre, amely jobban összehangolható a fluoreszcencia megfigyeléssel, és képes beállítani a háttér és a tárgyak színváltozásait az ideális eredmény elérése érdekében.
Sötéttér megfigyelési módszer
A sötét látómező valójában a sötét mező megvilágítása. Tulajdonságai eltérnek a fényes látómezőtől, ahol nem közvetlenül a megvilágítási fényt, hanem a vizsgált tárgy visszavert vagy szórt fényét figyeli. Ezért a látómező sötét háttér, míg a vizsgált tárgy világos képet mutat.
A sötét látómező elve az optikai Tindall-jelenségen alapul, ahol a finom por az emberi szem számára nem észlelhető közvetlen napfény hatására, amit az erős fény diffrakciója okoz. Ha a fényt feléje ferdítjük, úgy tűnik, hogy a részecskék térfogata megnő, és a fény visszaverődése miatt láthatóvá válnak az emberi szem számára. A sötétmezős megfigyeléshez szükséges speciális tartozék egy sötétmezős kondenzátor. Jellemzője, hogy a fénysugarat nem alulról felfelé engedi át a vizsgált tárgyon, hanem megváltoztatja a fénysugár útját, ferdén a vizsgált tárgy felé, így a megvilágító fény nem kerül közvetlenül az objektív lencséjébe, és a vizsgált tárgy felületén a visszavert vagy szórt fény által alkotott világos képet használja. A sötétterű megfigyelés felbontása sokkal nagyobb, mint a világos terű megfigyelésé, eléri a 0.02-0,004 μM-t.
