Két általánosan használt mikroszkópos megfigyelési módszer
1, Sötéttér megfigyelés
A sötét látómező tulajdonképpen a sötét mező megvilágítása Tulajdonságai eltérnek a világos látómezőtől, mivel nem közvetlenül a megvilágító fényt, hanem a vizsgált tárgy visszavert vagy szórt fényét figyeli, így a látómező sötét háttérré válik, míg a vizsgált tárgy világos képet ad.
A sötét mező elve az optikai Tyndall jelenségen alapul, ahol az erős fény által okozott diffrakció miatt a porrészecskéket az emberi szem nem tudja megfigyelni erős fény hatására Ha a fényt ferdén vetítjük rá, úgy tűnik, hogy a részecskék térfogata a fény visszaverődése miatt megnő, így láthatóvá válik az emberi szem számára.
A sötétterű megfigyeléshez szükséges speciális tartozék a sötétterű spotlámpa Jellemzője, hogy nem engedi át a fénysugarat a tárgyon alulról felfelé, hanem megváltoztatja a fény útját ferdén a tárgy felé irányítva, így a megvilágító fény nem kerül közvetlenül az objektív lencséjébe, és a visszaverődés vagy diffrakciós fény által alkotott fényes képet használja fel, mint a megfigyelési térben a fényes fény a megfigyelési térben sokkal nagyobb felbontású, mint a tárgy felületén. elérve a 0,02-0,004-et
2, fáziskontraszt tükör vizsgálati módszer
A fáziskontraszt mikroszkópia sikeres feltalálása az optikai mikroszkópok fejlesztésében fontos vívmány a modern mikroszkópos technikában Tudjuk, hogy az emberi szem csak a fényhullámok hullámhosszát (színét) és amplitúdóját (fényességét) tudja megkülönböztetni. Színtelen és átlátszó biológiai mintáknál a fény áthaladásakor a hullámhossz és az amplitúdó nem sokat változik, ami megnehezíti a minta megfigyelését világos mezőben
A fáziskontraszt mikroszkóp a vizsgált objektum optikai úthosszának különbségét használja tükörvizsgálathoz, hatékonyan kihasználva a fény interferencia jelenségét, hogy az emberi szem által nem megkülönböztethető fáziskülönbséget megkülönböztethető amplitúdókülönbséggé alakítsa. A színtelen és átlátszó anyagok is jól láthatóvá válhatnak. Ez nagyban megkönnyíti az élő sejtek megfigyelését, ezért a fáziskontraszt mikroszkópiát széles körben alkalmazzák a fordított mikroszkópokban
A fáziskontraszt mikroszkópia alapelve, hogy a mintán áthaladó látható fény optikai útkülönbségét amplitúdó-különbséggé alakítja, ezáltal javítja a kontrasztot a különböző struktúrák között, tisztává és láthatóvá teszi azokat. Ha az optikai útkülönbséget további 1/4 λ-val növeljük vagy csökkentjük, az optikai útkülönbség 1/2 λ lesz, és a két fénysugár közötti interferencia a tengely kombinálása után növekszik vagy csökken, javítva a kontrasztot Felépítését tekintve a fáziskontraszt mikroszkópoknak két
Különleges különbségek a hagyományos optikai mikroszkópokhoz képest:
1. A fényforrás és a kondenzátor között egy gyűrű alakú membrán található, amelynek feladata egy üreges fénykúp kialakítása, amely áthalad a kondenzátoron és a mintára fókuszál.
2. Szögfázisú lemez: Az objektívhez magnézium-fluoriddal bevont fázislemezt adunk, amely 1/4 λ-al késleltetheti a közvetlen vagy szórt fény fázisát. Két típusra osztható:
(1) . A+fázisú lemez: Késleltesse a közvetlen fényt 1/4 λ-val, és a tengelyek kombinálása után adja hozzá a két fényhullámkészletet. Az amplitúdó növekszik, és a minta szerkezete világosabbá válik, mint a környező közeg, fényes kontrasztot (vagy negatív kontrasztot) képezve.
(2) . B+fázis lemez: Késleltesse a szórt fényt 1/4 λ-val, és vonja ki a fényhullámokat két fénysugárhalmaz tengelyének kombinálása után, ami az amplitúdó csökkenését és sötét kontrasztot (vagy pozitív kontrasztot) eredményez. A szerkezet sötétebb lesz, mint a környező közeg
