A fényútjuk alapján kétféle fluoreszcens mikroszkóp létezik.
1. Transzmissziós fluoreszcenciás mikroszkóp: A gerjesztő fényforrás egy kondenzátoron keresztül halad át a minta anyagán a fluoreszcencia gerjesztésére. Általában sötétmezős kollektort vagy közönséges kollektort használnak, és a reflektort úgy állítják be, hogy a gerjesztő fényt a mintára terelje és oldalirányban sugározza. Ez egy régebbi fluoreszcens mikroszkóp. Előnye, hogy kis nagyításnál erős a fluoreszcencia, hátránya viszont, hogy a fluoreszcencia gyengül a nagyítás növekedésével. Ezért jobb a nagyobb mintaanyagok megfigyelése.
2. Az epifluoreszcens mikroszkóp a modern időkben kifejlesztett új típusú fluoreszcens mikroszkóp. A különbség a fentiektől az, hogy a gerjesztő fény az objektív lencséjéről lefelé esik a próbatest felületére, vagyis ugyanazt az objektívet használják megvilágítási kondenzátorként és fluoreszcencia gyűjtésére szolgáló objektívként. Kétszínű sugárosztót kell hozzáadni az optikai úthoz, ami 45%-ban az optikai uránnal. Szög, a gerjesztő fény visszaverődik az objektív lencséjébe, és a mintára koncentrálódik. A minta által keltett fluoreszcencia, valamint az objektívlencse felületéről és a fedőüveg felületéről visszavert gerjesztő fény egyszerre jut be az objektívbe és tér vissza a dikromatikus sugárosztóba, így a gerjesztő fény A fluoreszcenciától elkülönülve a maradék gerjesztés a fényt ezután elnyeli a blokkoló szűrő. Ha különböző gerjesztőszűrő/kétszínű nyalábosztó/blokkoló szűrő kombinációs betéteket használ, akkor a különböző fluoreszcens reakciótermékek igényeit kielégítheti. Az ilyen típusú fluoreszcens mikroszkóp előnye, hogy a látómező egyenletesen megvilágított, a kép tiszta, és minél nagyobb a nagyítás, annál erősebb a fluoreszcencia.
(2) A fluoreszcens mikroszkóp használata.
1. Kapcsolja be a fényforrást, és az ultranagy nyomású higanylámpának néhány percig fel kell melegednie, hogy elérje legfényesebb pontját.
2. A transzmissziós fluoreszcens mikroszkópokhoz a szükséges gerjesztő szűrőt a fényforrás és a kondenzátor közé, valamint a megfelelő blokkoló szűrőt az objektívlencse mögé kell felszerelni. Az epifluoreszcens mikroszkópoknak be kell helyezniük a szükséges gerjesztőszűrőt/kétszínű nyalábosztót/blokkoló szűrőbetétet a fényút nyílásába.
3. Alacsony nagyítású mikroszkóp segítségével figyelje meg és állítsa be a fényforrás középpontját a különböző fluoreszcens mikroszkóp modellek beállítóeszközei szerint úgy, hogy az a teljes megvilágítási pont közepén legyen.
4. Helyezze el a mintadarabot, és állítsa be a fókuszt a megfigyeléshez. Használat közben ügyeljen: A szemkárosodás elkerülése érdekében ne figyelje közvetlenül a szűrőt a szemével; ha a mintát olajlencsével figyeli, speciális, nem fluoreszkáló olajlencsét kell használnia; a nagynyomású higanylámpa nem nyitható újra azonnal a kikapcsolása után. 5 perc múlva újraindítható, különben instabil lesz és befolyásolja a higanylámpa élettartamát.
(3) Figyelje meg a fluoreszcens mikroszkóp alatt a tanítási platformon, kék-lila fényszűrő használatával. Látható, hogy az átjáró o. A 01%-os akridinnarancssárga fluoreszcens festékkel megfestett sejtekben a sejtmagot és a citoplazmát gerjesztik, hogy két különböző színű fluoreszcenciát (sötétzöld és narancsvörös) hozzon létre.
