A fluoreszcens mikroszkópia és a lézeres konfokális mikroszkópia alapelvei
fluoreszcens mikroszkóp
1. A fluoreszcens mikroszkóp egy olyan eszköz, amely ultraibolya fényt használ fényforrásként a vizsgált tárgy megvilágítására, ami fluoreszcenciát bocsát ki, majd megfigyeli a tárgy alakját és helyét a mikroszkóp alatt. A fluoreszcens mikroszkóppal az intracelluláris anyagok abszorpcióját, szállítását, eloszlását és lokalizációját vizsgálják. A sejtekben lévő egyes anyagok, mint például a klorofill, fluoreszcenciát bocsáthatnak ki, miután ultraibolya sugárzásnak vannak kitéve; Bár egyes anyagok maguk nem tudnak fluoreszcenciát kibocsátani, fluoreszcens festékekkel vagy fluoreszcens antitestekkel való megfestés és ultraibolya fénnyel történő besugárzás után is fluoreszcenciát bocsáthatnak ki. A fluoreszcens mikroszkópia ezen anyagok kvalitatív és kvantitatív kutatásának egyik eszköze.
2. A fluoreszcens mikroszkóp elve:
(A) Fényforrás: A fényforrás különböző hullámhosszúságú fényt bocsát ki (az ultraibolya sugárzástól az infravörösig).
(B) Gerjesztőszűrős fényforrás: Olyan meghatározott hullámhosszú fényt sugároz, amely fluoreszcenciát tud előidézni a mintában, miközben blokkolja a gerjesztő fluoreszcenciához haszontalan fényt.
(C) Fluoreszcens minta: Általában fluoreszcens pigmenttel festik.
(D) Blokkoló szűrő: szelektíven továbbítja a fluoreszcenciát azáltal, hogy blokkolja azt a gerjesztést, amelyet a minta nem abszorbeált, és bizonyos hullámhosszakat is szelektíven sugároz fluoreszcenciában. Olyan mikroszkóp, amely ultraibolya fényt használ fényforrásként a besugárzott tárgyak fluoreszcenciájának kibocsátására. Az elektronmikroszkópot először Knorr és Harroska állította össze Berlinben, Németországban 1931-ben. Ez a fajta mikroszkóp nagy sebességű elektronsugarat használ fénysugarak helyett. Az elektronáramlás fényhullámokhoz képest jóval rövidebb hullámhossza miatt az elektronmikroszkóp nagyítása elérheti a 800000-szeresét, minimális felbontási határa 0,2 nanométer. A pásztázó elektronmikroszkóp, amelyet 1963-ban kezdték használni, lehetővé teszi az emberek számára, hogy lássák a tárgyak felületén lévő apró struktúrákat.
3. Alkalmazási kör: Kis tárgyak képeinek nagyítására szolgál. Általában biológia, orvostudomány, mikroszkopikus részecskék stb. megfigyelésére használják.
konfokális mikroszkóp
1. A konfokális mikroszkóp félig visszaverő féllencsét ad a visszavert fény útjához, amely a lencsén már áthaladt visszavert fényt más irányok felé hajlítja. Van egy terelőlemez, amelynek fókuszpontjában egy tűlyuk található, és a kis lyuk a fókuszpontban található. A terelőlap mögött egy fénysokszorozó cső található. Elképzelhető, hogy az érzékelési fény fókuszpontja előtt és után visszavert fényt ezen a konfokális rendszeren keresztül nem lehet a kis lyukra fókuszálni, hanem a terelőlemez blokkolja. Tehát amit a fotométer mér, az a fókuszpontban visszavert fény intenzitása.
2. Alapelv: A hagyományos optikai mikroszkópok terepi fényforrást használnak, és a minta egyes pontjainak képét a szomszédos pontokból származó diffrakció vagy szórt fény befolyásolja; A lézeres pásztázó konfokális mikroszkóp egy megvilágított tűlyukon áthaladó lézersugár által alkotott pontszerű fényforrást használ a minta fókuszsíkjának minden pontjának letapogatására. A minta megvilágított pontja a szonda tűlyukon kerül leképezésre, és pontról pontra vagy vonalra veszi a fotosokszorozó cső (PMT) vagy a termoelektromos csatolóeszköz (cCCD) a szonda tűlyuk után, gyorsan fluoreszkáló képet alkotva a számítógép képernyőjén. . A megvilágító tűlyuk és az érzékelési tűlyuk a tárgylencse fókuszsíkjához képest konjugálva van. A fókuszsíkon lévő pontok egyszerre fókuszálnak a megvilágítási tűlyukra és az emissziós tűlyukra, a fókuszsíkon kívüli pontok pedig nem jelennek meg az érzékelési tűlyukon. Ez egy konfokális képet eredményez, amely a minta optikai keresztmetszete, kiküszöbölve az általános mikroszkópos képek elmosódásának hátrányát.
3. Alkalmazási területek: gyógyászat, állat- és növénykutatás, biokémia, bakteriológia, sejtbiológia, szövetembriológia, élelmiszertudomány, genetika, farmakológia, élettan, optika, patológia, botanika, idegtudomány, tengerbiológia, anyagtudomány, elektronikai tudomány, mechanika , kőolajgeológia és ásványtan.
