A fluoreszcens mikroszkópia elve és szerkezeti jellemzői
A fluoreszcens mikroszkóp egy nagy fényhatékonyságú pontot használ egy bizonyos hullámhosszú fény kibocsátására (például ultraibolya fény 3650 hüvelyk vagy ibolya kék fény 4200 hüvelyk) egy színszűrő rendszeren keresztül gerjesztő fényként, és gerjeszti a mintában lévő fluoreszkáló anyagokat, hogy különféle fényt bocsátanak ki. fluoreszcencia színei. Ezt követően az objektívlencse és a szemlencse nagyításával figyelhető meg. Ily módon akkor is könnyen felismerhető, ha a fluoreszcencia erős háttér mellett, nagy érzékenységgel nagyon gyenge. Főleg a sejtszerkezet és -funkció, valamint a kémiai összetétel tanulmányozására használják. A fluoreszcens mikroszkóp alapszerkezete egy közönséges optikai mikroszkópból és olyan kiegészítőkből áll, mint a fluoreszcens fényforrás, gerjesztő szűrő, dikroikus nyalábleválasztó és blokkoló szűrő. A fluoreszkáló fényforrások általában ultranagy nyomású higanylámpákat (50-200W) használnak, amelyek különböző hullámhosszúságú fényt bocsátanak ki. Azonban minden fluoreszcens anyagnak van egy gerjesztő fény hullámhossza, amely a legerősebb fluoreszcenciát produkálja, ezért gerjesztő szűrőket (jellemzően ultraibolya, lila, kék és zöld gerjesztő szűrőket) kell hozzáadni ahhoz, hogy csak egy bizonyos hullámhosszú gerjesztő fény tudjon áthatolni és besugározni a gerjesztő fényt. mintát, miközben elnyeli az összes többi fényt. A gerjesztő fénnyel történő besugárzást követően minden anyag nagyon rövid idő alatt a besugárzási hullámhossznál hosszabb látható fluoreszcenciát bocsát ki. A fluoreszcenciának van specifitása, és általában gyengébb, mint a gerjesztő fény. A specifikus fluoreszcencia megfigyeléséhez blokkolást (vagy elnyomást) kell hozzáadni az objektívlencse mögé, és kombinálni kell.
Különbség a fluoreszcens mikroszkóp és a közönséges mikroszkóp között
1. A világítási módszer általában egy esősugaras típusú, amelyben a fényforrást objektívlencsén keresztül vetítik a mintára;
2. A fényforrás ultraibolya fény, rövidebb hullámhosszú és nagyobb felbontású, mint a hagyományos mikroszkópok;
3.Két speciális szűrő található, a fényforrás előtti a látható fény kiszűrésére szolgál, a szemlencse és az objektívlencse közötti pedig az ultraibolya sugarak kiszűrésére szolgál az emberi szem védelmére.
A fluoreszcens mikroszkóp az optikai mikroszkópia egyik fajtája is, a fő különbség a különböző gerjesztési hullámhosszak. Ez határozza meg a fluoreszcens mikroszkóp és a közönséges optikai mikroszkóp közötti szerkezeti és felhasználási különbségeket.
A fluoreszcens mikroszkópia az immunfluoreszcens citokémia alapvető eszköze. Fő összetevőkből áll, mint például egy fényforrás, egy szűrőlemez rendszer és egy optikai rendszer. Egy bizonyos hullámhosszú fény segítségével gerjeszti a mintát, hogy fluoreszcenciát bocsásson ki, és felnagyítja azt egy objektívlencsén és szemlencserendszeren keresztül, hogy megfigyelje a minta fluoreszcens képét.
