Az inverz fluoreszcens mikroszkópia helyes alkalmazása
Az invertált fluoreszcens mikroszkóp egy többfunkciós mikroszkóp, amelyet a csúcsminőségű biológiai tudományos kutatások területén használnak. Szerkezete bonyolult és drága. Ezért ahhoz, hogy a végzős orvostanhallgatók megfelelően elsajátítsák az inverz fluoreszcens mikroszkóp működését és használati normáit, a tanároknak először meg kell tanítaniuk az invertált fluoreszcens mikroszkóp alapismereteit, mielőtt bemutatnák az invertált fluoreszcens mikroszkóp tényleges működését. Be kell mutatniuk az inverz fluoreszcencia mikroszkóp felépítését, elvét, funkcióját és alapvető használati módjait, majd bemutatni a különböző minták különböző funkcióit konkrét felhasználási műveletekben, fokozatosan szabványosítva az inverz fluoreszcens mikroszkóp működését és használatát az orvosi végzettségű hallgatók számára.
1. A vizuális megfigyelés helyes használata. A fordított fluoreszcens mikroszkóp egyik funkciója a világos látómezőben történő megfigyelés. Alapelve, hogy a minta egyes részeinek fényelnyelése után világos háttérben történő leképezést érjünk el. Főleg festett vagy elszíneződött sejtek, szövetszeletek és egyéb minták megfigyelésére alkalmas.
2. A differenciális megfigyelés helyes alkalmazása. Az inverz fluoreszcens mikroszkóp második funkciója a fáziskülönbség megfigyelése. Alapelve, hogy a minta különböző részeinek optikai útkülönbségét konvertálja amplitúdó-különbséggé, és egy fáziskülönbség-objektíven keresztül figyeli meg fázislemezzel és egy kör alakú apertúrájú spotlámpával. Elsősorban élő sejtek vagy festetlen szövetszeletek megfigyelésére alkalmas. A kísérleti oktatás során amellett, hogy az orvosdiplomás hallgatókat helyesen irányítjuk a fáziskülönbség-megfigyelés alapvető működési módszereinek követésére, fontosabb, hogy fáziskülönbség-megfigyeléssel irányítsuk őket a minták megértéséhez és elsajátításához. Számukra a jövőbeni tudományos kutatások során leggyakrabban alkalmazott módszer a tenyésztett sejtek mikroszkópos megfigyelése. Először is, a sejtfelszerelés kiválasztásához általában üveg- és műanyag tenyészedények, tányérok, palackok használata javasolt. Többnyire színtelenek és átlátszóak, és közvetlenül megfigyelhetők fordított fluoreszcens mikroszkóp alatt anélkül, hogy ki kellene önteni a sejtfolyadékot vagy más kezeléseken kellene keresztülmenniük. Másodszor, mikroszkópos megfigyelés közben ne nyissa fel véletlenül a berendezés fedelét, hogy elkerülje a sejtek szennyeződését. Végül a kezelők számára kesztyűt, maszkot és fehér köpenyt kell viselni, hogy ne csak saját egészségüket védjék, hanem a sejtszennyeződést is megelőzzék.
3. A fluoreszcencia megfigyelés helyes alkalmazása. Az inverz fluoreszcens mikroszkóp harmadik funkciója a fluoreszcencia megfigyelése. Alapelve az, hogy gerjesztő fényt használnak a minta gerjesztésére, hogy fluoreszcenciát hozzanak létre, ezáltal elérve a minta alakjának és helyzetének megfigyelését. Főleg fluoreszcenciával jelölt minták megfigyelésére alkalmas. A fluoreszcencia megfigyelése az inverz fluoreszcens mikroszkópia egyik fontos funkciója, drága tartozékokkal és speciális felhasználással. Annak érdekében, hogy az orvosi végzettségű hallgatók megfelelően elsajátítsák a fluoreszcencia megfigyelés működési normáit, a tanárok nemcsak az alapvető működési módszereket tanítják meg nekik, hanem, ami még fontosabb, megtanítják nekik annak egyediségét. Először is, a minta előkészítésekor a tárgylemez és a fedőüveg felületének simának és megfelelő vastagságúnak kell lennie (a tárgylemeznek 0,8 mm és 1,2 mm között kell lennie, a fedőüvegnek pedig kb. {{5) }},17 mm); A mintának megfelelő vastagságúnak kell lennie, elkerülve a sejtek átfedését vagy a szennyeződések elfedését; A tömítőszernek glicerin és karbonát puffer egyenlő keverékét kell használnia (0,5 mol/L pH 9.{10}}.5). Másodszor, a fluoreszcenciás megfigyelés előtt le kell kapcsolni a szoba világítását és a fordított fluoreszcenciás mikroszkóp fehér fényét, hogy sötét helyiségben legyenek. Végül a fluoreszcencia megfigyelésnél szigorúan ellenőrizni kell a megfigyelési időt, általában 1-2 órát, különben a fluoreszcencia lecsökken és eltűnik; A fényforrás beállításakor védőszemüveget kell viselni, hogy elkerüljük a szemüveg UV-károsodását.
4. A képrögzítés helyes használata. A tudományos kutatásban nem csak az szükséges, hogy az inverz fluoreszcens mikroszkóppal több megfigyelést is el lehessen végezni, hanem az is, hogy az invertált fluoreszcens mikroszkóppal képrögzítést is el lehessen érni. Az inverz fluoreszcens mikroszkóp rendszer az optikai mikroszkópot egy számítógéppel kombinálja fotoelektromos átalakítás révén, ami nemcsak mikroszkópos megfigyelést tesz lehetővé a szemlencsén, hanem valós idejű dinamikus képmegfigyelést, szerkesztést és számítógépen való tárolást is.
