A fluoreszcens mikroszkóp felépítése és főbb összetevői
A fluoreszcens mikroszkópia alapvető eszköz az immunfluoreszcens citokémiában. Olyan fő alkatrészekből áll, mint a fényforrás, a szűrőlemez rendszer és az optikai rendszer. Ez egy bizonyos hullámhosszú fény használata a minta gerjesztésére fluoreszcencia kibocsátására, és a minta fluoreszcens képének megfigyelése az objektívlencse és az okulárrendszer erősítésével.
A fluoreszcens mikroszkóp felépítése és főbb összetevői
(1) Fényforrás
Napjainkban a 200 W-os ultra-nagynyomású higanylámpákat gyakran használják fényforrásként. Kvarcüvegből készülnek, középen gömb alakúak, belül pedig bizonyos mennyiségű higanyt töltenek be. Munka közben a két elektróda közötti kisülés hatására a higany elpárolog, és a golyóban lévő légnyomás gyorsan megemelkedik. Amikor a higany teljesen elpárolog, elérheti a 50-70 normál légköri nyomást, és ez a folyamat általában körülbelül 5-15 percet vesz igénybe. Az ultra-nagynyomású higanylámpa lumineszcenciája a fénykvantumok kibocsátásának eredménye a higanymolekulák folyamatos disszociációja és redukciója során az elektródák közötti kisülés következtében. Erős ultraibolya és kék-ibolya fényt bocsát ki, ami elegendő a különféle fluoreszcens anyagok gerjesztésére, ezért széles körben alkalmazzák a fluoreszcens mikroszkópiában.
Az ultranagy nyomású higanylámpák is sok hőt bocsátanak ki. Ezért a lámpaháznak jó hőelvezetési feltételekkel kell rendelkeznie, és a munkakörnyezet hőmérséklete nem lehet túl magas.
Az új ultra-nagynyomású higanylámpa a használat kezdetén nagyfeszültség nélkül is meggyújtható. Egy bizonyos használat után nagyfeszültségről (kb. 15000V) kell beindítani. Indítás után a karbantartási üzemi feszültség általában 50-60V, az üzemi áram pedig körülbelül 4A. A 200 W-os ultra-nagynyomású higanylámpa átlagos élettartama körülbelül 200 óra, ha minden alkalommal 2 órán keresztül használják. Minél rövidebb a munkaidő, annál rövidebb az élettartam. Ha csak 20 percig használja, az élettartama 50 százalékkal csökken. Ezért használata során minimalizálja az indítások számát. Az izzó használata során fényhatékonysága fokozatosan csökken. Miután a lámpa kialszik, várja meg, amíg lehűl, mielőtt újraindítaná. Ne kapcsolja ki azonnal az izzót, miután meggyújtotta, nehogy megsérüljön az elektróda a hiányos higanypárolgás miatt. Általában 15 percet kell várni. Az ultra-nagynyomású higanylámpa nagy nyomása és az erős ultraibolya sugárzás miatt az izzót a lámpakamrába kell helyezni, mielőtt meggyulladna, hogy ne sértse meg a szemet és ne okozzon működést robbanás esetén. .
Az ultra-nagynyomású higanylámpa (100 W vagy 200 W) fényforrás áramköre és több alkatrésze, beleértve a transzformátort, az előtétet és az indítót. A lámpakamrában van egy rendszer az izzó fényes középpontjának beállítására. Az izzókörte mögé alumínium bevonatú homorú reflektor, elöl pedig fénygyűjtő lencse került.
A hazai ultra-nagynyomású higanylámpa GCQ-200 jó teljesítményű, és helyettesítheti az importált izzókat, például az HBO-t-200. Az átlagos élettartam több mint 200 óra, és az ára viszonylag alacsony.
Az országomban kifejlesztett, egyszerű és hordozható, magas színhőmérsékletű bróm-volfrám fluoreszkáló fényforrás kis méretű, könnyű súlyú, alacsony fogyasztású, AC és DC kettős felhasználású (egyenáramú tápegységgel), könnyen hordozható, könnyen használható, és népszerűsítették és alkalmazták.
(2) Színszűrő rendszer
A színszűrő rendszer fontos része a fluoreszcens mikroszkópnak, amely egy gerjesztő szűrőlemezből és egy nyomószűrő lemezből áll. A szűrőlemez modellje és az egyes gyártók neve gyakran nem egységes. A szűrőlapokat általában az alapszínről nevezték el, az elülső betűk a színt, a hátulsó betűk az üveget, a számok pedig a modell jellemzőit. olimpiai mikroszkóp
(3) Objektív lencse
Különféle objektívek használhatók, de akromatikus objektíveket használnak, mert autofluoreszcenciájuk minimális, fényáteresztési tulajdonságaik (hullámhossz-tartomány) alkalmasak a fluoreszcenciára. Mivel a kép fluoreszcencia fényereje a mikroszkóp látómezőjében arányos az objektív lencse rekesznyílásának négyzetével és fordítottan arányos a nagyításával, a fluoreszcens kép fényerejének javítása érdekében egy nagy méretű objektívet kell használni. rekesznyílás arányt kell használni. Főleg nagy nagyításnál nagyon szembetűnő a hatása. Ezért az elégtelen fluoreszcenciájú mintáknál nagy rekesznyílású objektívet kell használni a lehető legkisebb okulárral (4×, 5×, 6,3× stb.).
(4) Tükör
A reflektor fényvisszaverő rétege általában alumínium bevonatú, mivel az alumínium kevésbé nyeli el az ultraibolya fény és a látható fény kék-lila tartományában, és a visszaverődés több mint 90 százalék, míg az ezüst visszaverődése csak 70 százalék. Általában lapos reflektort használnak.
(5) Kondenzátor
A fluoreszcens mikroszkópiára tervezett kondenzátorok kvarcüvegből vagy más UV-átlátszó üvegből készülnek. Kétféle tiszta és sötét mezős kondenzátor létezik. Vannak fáziskontraszt fluoreszcens koncentrátorok is.
(6) Epi-light eszköz
Az új típusú epi-light eszköz az, hogy miután a fényforrás fénye az interferencia-spektroszkópiai szűrőt éri, a szűrőn lévő bevonat tulajdonságai miatt a rövid hullámhosszú rész (ultraibolya és lila kék) visszaverődik. Amikor a szűrő a fényforrás felé néz, a szög 45°. Ha meg van döntve, függőlegesen lő az objektívre, és az objektíven keresztül a mintára lövöldöz, így a minta gerjesztődik. Ekkor az objektívlencse közvetlenül fénygyűjtőként működik. Ugyanakkor a szűrő hosszú része (zöld, sárga, piros stb.) átlátszó a szűrő számára, így nem verődik vissza az objektívlencse irányába, és a szűrő gerjesztő szűrőlemezként működik, mivel a minta fluoreszcenciája a látható fény hosszú hullámhosszú tartományában van, áthaladhat a szűrőn és elérheti a szemlencsét megfigyelésre, a fluoreszcens kép fényereje a nagyítás növekedésével nő, és erősebb, mint az áteresztett fény forrás nagy nagyítással. A transzmissziós fényforrás funkciója mellett alkalmasabb az átlátszatlan és áttetsző minták, például vastag szeletek, szűrőmembránok, telepek, szövettenyésztési minták közvetlen megfigyelésére. Az elmúlt években kifejlesztett új fluoreszcens mikroszkópok többnyire epi-light eszközöket használnak, ezeket epifluoreszcens mikroszkópoknak nevezzük.
