Sztereó fluoreszcens mikroszkóp használata és óvintézkedések
Utasítás:
(1) Helyezze az anyaglapot a színpadra.
(2) Kapcsolja be a fluoreszcens mikroszkóp feszültségstabilizátorát. Ezután nyomja meg a startcsoportot az UV lámpa begyújtásához, és ne kapcsolja ki 15 percen belül, és ne indítsa újra 3 percen belül.
(3) Fordítsa a gerjesztő szűrőt v állásba, a színleválasztó szűrőt v állásba, és válasszon egy 495 vagy 475 nm-es blokkoló szűrőt.
(4) A mikroszkópos vizsgálathoz válassza az uvFL40, uvFL100 fluoreszcens objektívmikroszkópot.
(5) Adjon nem fluoreszkáló olajat a tárgylemezre, először használjon 40-szeres, majd 100-szoros fókuszáló mikroszkópot az ellenőrzéshez. Fluoreszcencia jelenik meg.
(7) Mivel a fluoreszcens anyagok fluoreszcenciája az idő múlásával fokozatosan gyengül, ha ultraibolya fénnyel besugározzák őket, a látómezőt gyakran kell változtatni a mikroszkópos vizsgálat során.
(8) Az uvFL10 vagy uvFL20 kis nagyítású mikroszkópok is használhatók anyagok vizsgálatára (kis teljesítményű lencsék használatakor nem adnak hozzá fluoreszkáló olajat).
A fluoreszcens kép rögzítési módja:
A fluoreszcens mikroszkóp által látott fluoreszcencia képnek morfológiai jellemzői és fluoreszcencia színe és fényereje egyaránt van. Az eredmények megítélésekor a kettőt kombinálni kell az átfogó megítéléshez. Az eredményeket szubjektív mutatók, azaz a dolgozók vizuális megfigyelése alapján rögzítik. Általános minőségi megfigyelésként alapvetően megbízható. A technológia és a tudomány fejlődésével objektív mutatókat használnak az ítélkezési eredmények különböző mértékű rögzítésére, ilyenek például a sejtspektrofotométerek, képelemzők és egyéb műszerek. Az ezen eszközök által rögzített eredményeket azonban szubjektív ítéletekkel is kombinálni kell.
A fluoreszcens mikroszkópos fényképezés nagyon szükséges a fluoreszcens képek rögzítéséhez. Mivel a fluoreszcencia könnyen elhalványul és gyengül, az eredményeket valós időben kell rögzíteni. A módszer alapvetően megegyezik a hagyományos fotomikrográfia módszerével. Csak nagy sebességű fényérzékeny filmet kell használnia, például ASA200 vagy újabb vagy 24. feletti. Mivel az ultraibolya fény erős hatással van a fluoreszcencia kioltására, például a FITC markerekre, a fluoreszcencia fényereje 50 százalékkal csökken, ha 30 másodpercig ultraibolya fénnyel besugározzuk. Ezért, ha az expozíciós sebesség túl lassú, a fluoreszkáló kép nem készíthető. Az általános kutatási fluoreszcens mikroszkópok félautomata vagy teljesen automatikus fotomikrográfiai rendszerrel rendelkeznek.
Óvintézkedések:
(1) Szigorúan a fluoreszcens mikroszkóp gyári utasításainak megfelelően működjön, és ne változtassa meg a programot tetszés szerint.
(2) Az ellenőrzést sötét helyiségben kell elvégezni. Miután belépett a sötétkamrába, csatlakoztassa a tápegységet, és gyújtsa meg az ultramagas nyomású higanylámpát 5-15 percig. Miután a fényforrás erős fénye stabil, a szemek teljesen alkalmazkodnak a sötétkamrához, majd elkezdik megfigyelni a mintát.
(3) Annak elkerülése érdekében, hogy az ultraibolya sugarak károsítsák a szemet, a fényforrás beállításakor védőszemüveget kell viselni.
(4) Az ellenőrzési idő lehetőleg 1-2 óra minden alkalommal. Ha ez meghaladja a 90 percet, az ultranagynyomású higanylámpa fényereje fokozatosan csökken, és a fluoreszcencia gyengül; miután a mintát ultraibolya sugárzással sugározták be 3-5 percig, a fluoreszcencia is jelentősen gyengül; ezért nem haladhatja meg a legfeljebb 2-2 órát. 3 óra.
(5) A fluoreszcens mikroszkóp fényforrásának élettartama korlátozott, és a mintákat együttesen kell ellenőrizni az időmegtakarítás és a fényforrás védelme érdekében. Meleg időben ventilátorokat kell hozzáadni a hő elvezetéséhez, és az új izzókat a használati idejük kezdetétől rögzíteni kell. Ha a lámpa kialudása után újra szeretné használni, meg kell várnia, amíg az izzó kellőképpen lehűl, mielőtt meggyújtja. Kerülje a fényforrás napi többszöri meggyújtását.
(6) Figyelje meg a mintát közvetlenül a festés után, mivel a fluoreszcencia idővel fokozatosan gyengül. Ha a mintát polietilén műanyag zacskóban 4 fokos hőmérsékleten tároljuk, a fluoreszcencia gyengülési ideje késleltethető, és megakadályozható a rögzítőszer elpárolgása.
(7) A fluoreszcencia fényerejének megítélési szabványa: általában négy szintre oszlik, azaz "egy" - nincs vagy gyenge fluoreszcencia látható. " plusz "—Csak jól látható fluoreszcencia látható. " plusz plusz "—Látható és világos
