A többfoton lézeres pásztázó mikroszkóp előnyei és hátrányai
A Multi-Photon Laser Scanning Microscopy egy lézeres pásztázó mikroszkóp technológián alapuló kísérleti módszer, amely több **optikai metszeti képességet biztosít a 3D megfigyelésben. A többfoton fluoreszcens gerjesztési módszer a vörös vagy közeli infravörös fény hosszú hullámhosszát használva nagy felbontású fluoreszcens képeket készít a mintákról az aktív minták minimális elpusztításával, így alkalmas élő sejtek, különösen vastag élő szövetek, például agyszeletek, embriók, egész szervek, sőt egész organizmusok.
Az előnyök a következők:
1, a vörös fény vagy az infravörös fény gerjesztése, a fényszórás kicsi(a szétszóródásakicsirészecskék és az inverz arány negyedik hatványának hullámhossza).
2, nem igényel tűlyukat, több szórt fotont gyűjthet össze a képalkotó keresztmetszetről.
3, a tűlyuk nem tud különbséget tenni a szétszórt fotonok között, amelyeket a fókuszon kívüli régió vagy fókuszterület bocsát ki, a mély képalkotásban a többfoton jel-zaj arány jó.
4, ultraibolya vagy látható fény egyfotonos gerjesztése, amelyet a sugárban használnak, hogy elérjék a fókuszsíkot, mielőtt a minta könnyen felszívódik és csillapodik, nem könnyű a mély gerjesztést.
5, a biológiai mikroszkópos megfigyelésnél * az első szempont, hogy magának a szervezetnek az aktív állapotát ne károsítsa, a víz, az ionkoncentráció, az oxigén- és tápanyag-keringés fenntartása. Fénymegfigyelési alkalmakkor a hő- és a fotonenergiának is a sejtben kell maradnia anélkül, hogy a besugárzás, a fényenergia mennyisége sérülne.
6, több foton mikroszkóp is számos előnnyel rendelkezik. Mint például a háromdimenziós felbontás, a behatolás mélysége, a szórási hatékonyság, a háttérfény, a jel-zaj arány, a vezérlés stb., Vannak korábbi lézermikroszkópok, amelyek nem rendelkeznek, vagy összehasonlíthatatlanok túl a jellemzőkkel.
A többfoton konfokális lézeres pásztázó mikroszkópot kiterjesztették különféle kutatási és alkalmazási területekre. Képes a minták háromdimenziós, roncsolásmentes megfigyelésére természetes állapotukban, és javíthatja a rendszer felbontását és jel-zaj arányát. Az anyagtulajdonságok többfotonos gerjesztés utáni változását felhasználva tetszőleges irányú háromdimenziós magassági adattárolás és háromdimenziós mikrogyártás is megvalósítható, aminek nagy az alkalmazási értéke. Elképzelhető, hogy a gépek, anyagok, lézertechnológia és a többfoton konfokális mikroszkóppal kapcsolatos egyéb technológiák továbbfejlesztésével a többfoton konfokális lézer pásztázó mikroszkóp egyre nagyobb fejlődést és szélesebb körű alkalmazást tesz lehetővé.
A hátrányok a következők:
1, csak fluoreszcens képalkotás.
2, ha a minta olyan kromoforokat tartalmaz, amelyek elnyelik a gerjesztő fényt, mint példáulpigmentek, a mintatermikusan károsodhat.
3, a felbontás kissé csökkent, habára konfokális apertúra egyidejű használatával javítható, dejelveszteség lesz.
4. A többfoton pásztázó mikroszkópia költsége magas a drága ultragyors lézerek korlátozottsága miatt.
