A fluoreszcens mikroszkóp elve és szerkezeti jellemzői
A fluoreszcens mikroszkóp egy nagy fényhatékonyságú pontot használ bizonyos hullámhosszúságú fény (például ultraibolya fény 3650 vagy ibolya-kék fény 4200) kibocsátására a színszűrő rendszeren keresztül gerjesztő fényként, majd gerjeszti a mintában lévő fluoreszkáló anyagokat, hogy kibocsássanak. fluoreszcenciát különböző színekkel, majd az objektívlencse és a szemlencse erősítésével figyeli őket. Ily módon az erős kontrasztos háttér alatt, még akkor is, ha a fluoreszcencia nagyon gyenge, könnyen azonosítható és nagy érzékenységgel rendelkezik. Főleg a sejtek szerkezetének és működésének, valamint kémiai összetételének tanulmányozására használják. A fluoreszcens mikroszkóp alapszerkezete közönséges optikai mikroszkópból és néhány kiegészítőből áll (például fluoreszcens fényforrás, gerjesztő szűrő, dikroikus nyalábosztó és blokkoló szűrő stb.). Fluoreszcens fényforrás —— Általában ultranagy nyomású higanylámpát (50-200W) használnak, amely különböző hullámhosszú fényt bocsát ki, de mindegyik fluoreszkáló anyagnak van egy gerjesztési fényhullámhossza, amely a legerősebb fluoreszcenciát produkálja, ezért gerjesztő szűrők (általában ultraibolya, lila, kék és zöld gerjesztő szűrők) hozzáadása szükséges ahhoz, hogy a gerjesztő fénynek csak egy bizonyos hullámhossza jusson át a mintára, és az összes többi fény elnyelődik. Az egyes anyagok gerjesztőfénnyel történő besugárzása után nagyon rövid időn belül a besugárzási hullámhossznál hosszabb látható fluoreszcenciát bocsátanak ki. A fluoreszcencia specifitása általában gyengébb, mint a gerjesztő fény. A specifikus fluoreszcencia megfigyeléséhez blokkolni (vagy elnyomni) kell az objektívlencse mögött, és együtt kell használni.
Különbség a fluoreszcens mikroszkóp és a közönséges mikroszkóp között
1. A megvilágítási mód általában epizodikus, vagyis a fényforrást az objektívlencsén keresztül vetítik a mintára;
2. A fényforrás ultraibolya fény, rövid hullámhosszú és nagyobb felbontású, mint a hagyományos mikroszkóp;
3. Két speciális szűrő van, a fényforrás előtti a látható fény kiszűrésére szolgál, a szemlencse és az objektívlencse közötti pedig az ultraibolya fény kiszűrésére szolgál az emberek szemének védelmére.
A fluoreszcens mikroszkóp egyfajta optikai mikroszkóp is, a fő különbség az, hogy eltérő a gerjesztési hullámhosszuk. Ez határozza meg a fluoreszcens mikroszkóp és a hagyományos optikai mikroszkóp közötti különbséget a szerkezetben és a felhasználásban.
A fluoreszcens mikroszkóp az immunfluoreszcens citokémia alapvető eszköze. Fényforrásból, szűrőlemez-rendszerből és optikai rendszerből áll. Bizonyos hullámhosszú fényt használ a minta gerjesztésére, hogy fluoreszcenciát bocsásson ki, és felnagyítja az objektívlencsén és az okulárrendszeren keresztül, hogy megfigyelje a minta fluoreszcens képét.
