Biológiai minták készítése és megfigyelése elektronmikroszkópokhoz
A mikroszkóp felbontása a használt fény hullámhosszától függ. Az 1933-ban megjelent elektronmikroszkóp lényegesen nagyobb felbontást ért el, mint egy optikai mikroszkóp, mivel fényforrásként a látható fénynél jóval rövidebb hullámhosszú elektronsugarakat használt. A különböző fényforrások egy sor különbséget is meghatároznak az elektronmikroszkópok és az optikai mikroszkópok között.
Az elektronsugaras képalkotás elveinek és a mintákra gyakorolt hatásának különbségei alapján a modern elektronmikroszkópok sokféle típusra fejlődtek ki. Jelenleg a leggyakrabban használt transzmissziós elektronmikroszkópok és pásztázó elektronmikroszkópok. Az előbbi teljes nagyítása 1000-10000000-szeres, míg az utóbbi 20-300000-szeres teljes nagyítással rendelkezik. Ez a kísérlet elsősorban kétféle mikroszkópminta, transzmissziós elektronmikroszkópos és pásztázó elektronmikroszkópos minta készítését mutatja be.
2, Berendezés
1. Az Escherichia coli törzs hajlamos.
2. Oldat vagy reagens: pentil-acetát, tömény kénsav, vízmentes etanol, steril víz, 2%-os nátrium-foszfotvolframát (pH 6,5-8,0) vizes oldat, 0,3%-os polivinil-formaldehid (kloroformban oldva) oldat, citokróm-acetát c.,2 ammónium-acetát c.,3 ammónium-2 p.BR
3. A műszerek vagy egyéb eszközök közé tartoznak a közönséges optikai mikroszkópok, rézhálók, porcelántölcsérek, főzőpoharak, Petri-csészék, steril csepegtetők, steril csipeszek, tűk, tárgylemezek, számlálólapok, vákuumbevonó gépek, kritikus pont szárítók stb.
3, Művelet lépései
(1) Minták előkészítése és megfigyelése transzmissziós elektronmikroszkópiához
1. Fémháló kezelése
Az optikai mikroszkóp mintáját egy tárgylemezre helyezzük megfigyelés céljából. Ám egy transzmissziós tükörben, mivel az elektronok nem tudnak áthatolni az üveglapon, hálóanyag csak hordozóként használható, amelyet általában hordozóhálónak neveznek. A hordozóháló a különböző anyagok és formák miatt különféle specifikációkra osztható, amelyek között általában 200-400 hálós (lyukszám) rézhálót használnak. A rézhálót használat előtt kezelni kell, hogy eltávolítsa a szennyeződéseket és tisztán tartsa, különben ez befolyásolja a hordozófólia minőségét és a mintafotók tisztaságát. A kísérletben használt 400 mesh-es rézhálót a következő módszerrel lehet kezelni: először áztassuk és úsztassuk pentil-acetáttal néhány órán keresztül, majd többször öblítsük le desztillált vízzel, végül merítsük és úsztassuk a rézhálót vízmentes etanolba a kiszárításhoz. Ha a rézháló a fenti módszerek után sem tiszta, akkor 1-2 percig hígított tömény kénsavban (1:1) áztatható, vagy 1%-os NaOH-oldatban néhány percig forraljuk, desztillált vízzel többször átöblítjük, majd vízmentes etanolban víztelenítjük későbbi felhasználásra.
