Bevezetés a többfoton lézeres pásztázó mikroszkópia előnyeibe és hátrányaiba
1. Vörös fényt vagy infravörös fényt használva gerjesztésre a fényszórás kicsi, a kis részecskék szóródása pedig fordítottan arányos a hullámhossz negyedik hatványával.
2. A képalkotó keresztmetszetről több szórt foton is összegyűjthető tűlyukak nélkül.
3. A tűlyuk nem tudja megkülönböztetni a defókuszált területről vagy a fókuszterületről kibocsátott szórt fotonokat, és a mély rétegekben végzett többfotonos képalkotás jel-zaj aránya jó.
4. Az egyfotonos gerjesztéshez használt ultraibolya vagy látható fényt a minta könnyen elnyeli és gyengíti, mielőtt a nyaláb elérné a fókuszsíkot, és nehéz a mély rétegeket gerjeszteni.
5. A biológiai mikroszkópos megfigyelésnél az első szempont, hogy magának a szervezetnek az aktív állapotát ne károsítsuk, és fenntartsuk a víz áramlását, az ionkoncentrációt, az oxigént és a tápanyagokat. Fénymegfigyelés esetén mind a hő-, mind a fotonenergiának a besugárzási mennyiségen és a fényenergián belül kell maradnia, hogy a sejtek ne sérüljenek.
6. A többfoton mikroszkópiának számos előnye van. Mint például a háromdimenziós felbontás, a mélységi behatolás, a szórási hatékonyság, a háttérfény, a jel-zaj arány, a vezérlés stb., mindegyik rendelkezik olyan jellemzőkkel, amelyekkel a korábbi lézermikroszkópok nem rendelkeztek, vagy nem tudtak összehasonlítani velük.
A többfoton lézeres pásztázó mikroszkópia hátrányai:
1. Csak fluoreszcenciát képes leképezni.
2. Ha a minta olyan kromoforokat tartalmaz, amelyek elnyelik a gerjesztő fényt, a minta termikusan károsodhat.
3. A felbontás kissé csökkent. Bár a konfokális lyukak egyidejű használatával javítható, jelveszteség lép fel.
4. A drága ultragyors lézerek miatt a többfotonos pásztázó mikroszkópok költsége viszonylag magas.
