Képalkotó módszerek a fluoreszcens mikroszkóp világos és sötét mezőihez
(1) Fényes mező képalkotás (BFI), amely csak a paraxiális tartományban átvitt elektronokat engedi át az objektív apertúrán, és világos háttéren sötét képet alkot. Minél kisebb az objektívlencse rekesznyílása, annál nagyobb a kontraszt a fényes mezőben; (2) Sötétmezős képalkotás (DFI), amely csak egy nagy szögű szórt sugár vagy egy kristály diffrakciós nyalábjának egy részét engedi át az objektívlencse apertúráján, miközben blokkolja a továbbított sugarat. Ez világos grafikus képet hoz létre sötét háttéren. Ez a sötét mezős képalkotási módszer javíthatja a képek kontrasztját, és fontos képalkotó módszer.
Körülbelül négy módszer létezik a fluoreszcens mikroszkópiára a sötét mezős képalkotás elérésére: (1) függőleges megvilágítás fenntartása az optikai tengely mentén, miközben mozgatja az objektív apertúráját; (2) Az optikai tengely irányában szórt nyalábok előállítására szolgáló ferde megvilágítás használatát középső sötéttér képalkotásnak (Center Dark Field Imaging, CDFI) nevezik; (3) Az objektívlencse rekesznyílása központi sugárzárral és kör alakú átlátszó területtel; (4) Használjon kör alakú átlátszó spotlámpát a fény érzékeléséhez és egy középső kör alakú furattal rendelkező objektív rekeszt. Az itt leírt * módszerek egyszerűek és kényelmesek, de elektronikus képalkotást alkalmaznak a távoli hüvelyben, ami nagy aberrációkat és rossz képminőséget eredményez. A második módszerrel elkerülhetők a fenti hátrányok, de a Leica fluoreszcens mikroszkóp objektív apertúrája csak a szórt diffrakciós elektronok kis részét fogadja, ami alacsonyabb hatásfokot eredményez. A rekesz oldalát gyakran nagyszámú elektron bombázza, ami könnyen aszimmetrikus szennyeződést okozhat, és befolyásolja a képminőséget. A kör alakú objektív ebben a tekintetben javult, de hátránya, hogy nehéz elkészíteni és nehéz elérni a teljes axiális szimmetriát. Tekintettel a világítási rendszerrel szemben támasztott viszonylag enyhe követelményekre, az utóbbi megoldás alkalmazható, amely magában foglalja egy kör alakú nyílás hozzáadását a kondenzátorhoz, hogy üreges megvilágítást biztosítson a mintának. Ennek az eszköznek a hatása. Képfelbontása közel állhat a fényes terepi képekéhez, miközben a kontraszt jelentősen javul.
