A fluoreszcens mikroszkóp alapművelete
a. Kapcsolja le a világítást a szobában, és kapcsolja be a mikroszkóp higanylámpáját;
b. Válassza ki a megfelelő szűrőt a minta által jelölt fluoreszceinnek megfelelően;
c. Helyezze el a mintát, és keressen megfelelő látómezőt;
d. Ha képeket szeretne készíteni, ellenőrizze, hogy a színes film be van-e helyezve a fényképezőgépbe;
e. Kapcsolja be a Selfie eszközt, válassza ki a kézi sebességfokozatot, a felvételi sebesség általában 0.5-10 másodpercen belül van;
f. Használat után kapcsolja ki az áramellátást, és készítsen feljegyzést a használatról. a
a
3. A fluoreszcens kép rögzítési módja
A fluoreszcens mikroszkóp által látott fluoreszcencia képnek morfológiai jellemzői és fluoreszcencia színe és fényereje egyaránt van. Az eredmények megítélésekor a kettőt kombinálni kell az átfogó megítéléshez. Az eredményeket szubjektív mutatók, azaz a dolgozók vizuális megfigyelése alapján rögzítik. Általános minőségi megfigyelésként alapvetően megbízható. A technológia és a tudomány fejlődésével objektív mutatókat használnak az ítélkezési eredmények különböző mértékű rögzítésére, ilyenek például a sejtspektrofotométerek, képelemzők és egyéb műszerek. Az ezen eszközök által rögzített eredményeket azonban szubjektív ítéletekkel is kombinálni kell. a
A fluoreszcens mikroszkópos fényképezés nagyon szükséges a fluoreszcens képek rögzítéséhez. Mivel a fluoreszcencia könnyen elhalványul és gyengül, az eredményeket valós időben kell rögzíteni. A módszer alapvetően megegyezik a hagyományos fotomikrográfia módszerével. Csak nagy sebességű fényérzékeny filmet kell használnia. Mivel az ultraibolya fény erős hatással van a fluoreszcencia kioltására, mint például a FITC markerek, a fluoreszcencia fényereje 50 százalékkal csökken, ha 30 másodpercig ultraibolya fénnyel besugározzuk. Ezért, ha az expozíciós sebesség túl lassú, a fluoreszkáló kép nem készíthető. Az általános kutatási fluoreszcens mikroszkópok félautomata vagy teljesen automatikus fotomikrográfiai rendszerrel rendelkeznek. a
a
4. Óvintézkedések a fluoreszcens mikroszkóp használatával kapcsolatban
a. Szigorúan a fluoreszcens mikroszkóp gyári utasításainak megfelelően működjön, és ne változtassa meg a programot tetszés szerint. a
b. Az ellenőrzést sötét helyiségben kell elvégezni. Miután belépett a sötétkamrába, csatlakoztassa a tápegységet, és gyújtsa meg az ultramagas nyomású higanylámpát 5-15 percig. Miután a fényforrás erős fénye stabil, a szemek teljesen alkalmazkodnak a sötétkamrához, majd elkezdik megfigyelni a mintát. a
c. Az ultraibolya sugarak szemkárosodásának elkerülése érdekében viseljen védőszemüveget a fényforrás beállításakor. a
d. Az ellenőrzési idő lehetőleg 1-2 óra minden alkalommal. Ha ez meghaladja a 90 percet, az ultranagynyomású higanylámpa fényereje fokozatosan csökken, és a fluoreszcencia gyengül; a minta ultraibolya fénnyel történő besugárzása után 3-5 percig a fluoreszcencia is jelentősen gyengül; ezért nem haladhatja meg a legfeljebb 2-3 órát. . a
e. A fluoreszcens mikroszkóp fényforrás élettartama korlátozott, és a mintákat központilag kell ellenőrizni, hogy időt takarítson meg és védje a fényforrást. Meleg időben ventilátorokat kell hozzáadni a hő elvezetéséhez, és az új izzókat a használati idejük kezdetétől rögzíteni kell. Ha a lámpa kialudása után újra szeretné használni, meg kell várnia, amíg az izzó kellőképpen lehűl, mielőtt meggyújtja. Kerülje a fényforrás napi többszöri meggyújtását. a
f. A festés után azonnal figyelje meg a mintát, mivel a fluoreszcencia idővel fokozatosan gyengül. Ha a mintát polietilén műanyag zacskóban 4 fokos hőmérsékleten tároljuk, a fluoreszcencia gyengülési ideje késleltethető, és megakadályozható a rögzítőszer elpárolgása. a
g. A fluoreszcencia fényerejének megítélési szabványa: általában négy szintre oszlik, vagyis a "-" azt jelenti, hogy nincs vagy gyenge fluoreszcencia látható. A "plusz" azt jelenti, hogy csak jól látható fluoreszcencia volt látható. A "plusz plusz" azt jelenti, hogy élénk fluoreszcencia látható. A "plusz plusz plusz" látható fényes fluoreszcenciát jelent.
