Különbségek a fluoreszcencia mikroszkópia és a konfokális mikroszkópia között
fluoreszcencia mikroszkóp
1. A fluoreszcencia mikroszkóp ultraibolya fényt használ fényforrásként az ellenőrzött objektum besugárzásához, ami azt okozza, hogy fluoreszcenciát bocsát ki, majd megfigyelje az objektum alakját és helyzetét a mikroszkóp alatt. A fluoreszcencia mikroszkópiát használják az anyagok abszorpciójának, transzportjának, eloszlásának és lokalizációjának tanulmányozására a sejtekben. A sejtekben található egyes anyagok, például a klorofill, ultraibolya sugárzásnak kitettek; Vannak olyan anyagok is, amelyek nem tudnak maguknak fluoreszcenciát bocsátani, de fluoreszcenciát is bocsáthatnak ki, ha fluoreszcens színezékekkel vagy fluoreszcens antitestekkel festenek, és ultraibolya fényben besugároznak. A fluoreszcencia mikroszkópia az egyik eszköz az ilyen anyagok kvalitatív és kvantitatív kutatásához.
2. A fluoreszcencia mikroszkóp alapelve:
(A) Fényforrás: A fényforrás különféle hullámhosszú fényt bocsát ki (az ultraibolya -tól az infravörösig).
(B) gerjesztő szűrő fényforrás: egy specifikus hullámhosszú fény továbbítása, amely fluoreszcenciát okozhat a mintában, miközben blokkolja az izgalmas fluoreszcenciához haszontalan fényt.
(C) Fluoreszcens minták: általában fluoreszcens pigmentekkel festett.
(D) Blokkoló szűrő: szelektíven továbbítja a fluoreszcenciát az gerjesztő fény blokkolásával, amelyet a minta nem abszorbeál, és a fluoreszcencia néhány hullámhosszát szintén szelektíven továbbítják. Mikroszkóp, amely ultraibolya fényt használ fényforrásként, hogy a megvilágított objektum fluoreszcenciát bocsát ki. Az elektronmikroszkópot először Knorr és Haruska összegyűjtötték a németországi Berlinben, 1931-ben. Ez a mikroszkóp nagysebességű elektronnyalábokat használ a fénysugarak helyett. Az elektronáramlás sokkal rövidebb hullámhossza miatt a fényhullámokhoz képest az elektronmikroszkóp nagyítása elérheti a 8 {3}} 0000 -szor, a minimális felbontási határérték 0,2 nanométer. A pásztázó elektronmikroszkóp, amelyet először 1963 -ban használtak, lehetővé teszi az emberek számára, hogy láthassák az apró szerkezeteket a tárgyak felületén.
3. alkalmazási kör: A kis tárgyak képeinek kibővítéséhez használják. Általában a biológia, az orvostudomány, a mikroszkópos részecskék stb. Megfigyeléseihez használják.
konfokális mikroszkóp
1. A konfokális mikroszkóp félig fényvisszaverő fél lencsét ad a visszavert fényúthoz, amely eltér a visszavert fényre, amely más irányba áthaladt a lencsén. A fókuszpontjában van egy terelőlyom, amelynek fókuszpontja található, és a terelőlap mögött egy fotomultiplier cső található. Elképzelhető, hogy a detektálási fény fókusza előtti és utáni visszavert fény nem összpontosítható a kis lyukra ezen a konfokális rendszeren keresztül, és a terelőlap blokkolja. Tehát a fotométer méri a tükrözött fényintenzitást a fókuszpontban.
2. alapelv: A hagyományos optikai mikroszkópok mező fényforrásokat használnak, és a mintán minden pont képét a szomszédos pontok diffrakciója vagy szétszórt fény befolyásolja; A lézeres szkennelés konfokális mikroszkóp egy lézernyalábot használ a lyukak megvilágításához, és egy pont fényforrást képez, hogy a minta fókusz síkján minden pontot beolvashasson. A minta megvilágított pontját a detektálási pinlyukon kell ábrázolni, és egy pontról vagy vonalra vett egy fotomultiplier cső (PMT) vagy egy hideg kapcsolóberendezés (CCCD) segítségével, miután a pinlyukot észlelte, gyorsan egy fluoreszcencia képet képez a számítógép monitor képernyőjén. A megvilágító lyuk és a detektálási lyuk konjugált az objektív lencse fókusz síkjához viszonyítva. A fókusz síkon lévő pontokat egyidejűleg a megvilágítási csapokra és az emissziós lyukra összpontosítják, és a fókusz síkon kívüli pontokat nem kell leképezni a detektáló pinlyukon. A kapott konfokális kép a minta optikai keresztmetszete, amely legyőzi az elmosódott képek hátrányát az általános mikroszkópokban.
