Mikroorganizmusok számának meghatározása - mikroszkópos közvetlen számlálási módszer!
Alapvető
A mikroszkópos közvetlen számlálási módszer egy egyszerű, gyors és intuitív módszer a vizsgálandó minta szuszpenziójának kis mennyiségének meghatározott területű és térfogatú speciális üveglemezre (más néven baktériumszámlálóra) helyezésére, és közvetlenül a számlálásra. egy mikroszkóp. Jelenleg itthon és külföldön a leggyakrabban használt baktériumszámlálók a következők: vérsejtszámláló tábla, Peteroff-Hauser baktériumszámláló és Hawksley baktériumszámláló stb. Ezek mindegyike használható szuszpenziók, például élesztő-, baktérium- és penészspórák számlálására. az alapelvek ugyanazok. Az utóbbi két baktériumszámláló össztérfogata 0.02mm3 fedőüveggel letakarva, a fedőüveg és a tárgylemez közötti távolság pedig mindössze 0,02 mm, ezért a kisméretű sejtek, mint pl. a baktériumokat olajimmerziós objektívvel lehet megfigyelni és megszámolni. A baktériumszámlálók használata mellett van egy becslési módszer is, amellyel mikroszkóp alatt közvetlenül megfigyelhető a kenet és a látómező aránya. Ezt a módszert általában a tej bakteriológiai vizsgálatára használják. A mikroszkópos közvetlen számlálási módszer előnye, hogy intuitív, gyors és könnyen kezelhető. De ennek a módszernek az a hátránya, hogy a mért eredmények általában az elhalt és élő baktériumok összege. Jelenleg létezik néhány módszer ennek a hiányosságnak a kiküszöbölésére, például a mikrokamrás tenyészetet festő élő baktériumok kombinálásával (rövid ideig) és sejtosztódást gátló anyagok hozzáadásával, hogy elérjék azt a célt, hogy csak élő baktériumokat számoljanak.
Ebben a kísérletben egy hemocitométert használtunk példaként a mikroszkóp alatti közvetlen számláláshoz. A másik két baktériumszámláló használati módjait az egyes gyártók útmutatójában találja meg. A mikroszkóp alatt végzett közvetlen számlálás hemocitométerrel egy általánosan használt mikrobiális számlálási módszer. A számlálótábla egy speciálisan készített üvegcsúszda, amelyen négy rés három platformot alkot; a középső szélesebb platformot egy rövid vízszintes rés két felére osztja, és a platform mindkét oldalát rács béleli. Mindegyik rács kilenc nagy négyzetre van osztva, és a középső nagy négyzet a számlálókamra. A számlálószoba léptékének általában két specifikációja van, az egyik az, hogy egy nagy négyzet 25 középső négyzetre, és minden középső négyzet 16 kis négyzetre van osztva; a másik az, hogy egy nagy négyzet 16 középső négyzetre van felosztva, és minden középső négyzet 25 kis négyzetre van osztva, de nem számít, milyen számlálótábla, 400 kis négyzet van benne. minden nagy négyzet. Minden nagy négyzet oldalhossza 1 mm, majd minden nagy négyzet területe 1 mm 2. A fedőüveg letakarása után a fedőüveg és a tolóüveg közötti magasság 0,1 mm, így a számláló kamra 0,1 mm (egy tízezred milliliter).
