A konfokális mikroszkóp és a közönséges optikai mikroszkóp összehasonlítása
A mikroszkóp a sejtek megfigyelésének fő eszköze. A fényforrástól függően két kategóriába sorolható: optikai mikroszkóp és elektronmikroszkóp. Az előbbi látható fényt (ultraibolya mikroszkóptól ultraibolya fényig) használja fényforrásként, míg az utóbbi elektronsugarat használ fényforrásként. A közönséges optikai mikroszkóp és a lézerkonfokális mikroszkóp ugyanahhoz az optikai mikroszkóphoz tartozik.
I. Általános optikai mikroszkóp
A hagyományos biológiai mikroszkóp három részből áll, nevezetesen: ① megvilágító rendszer, beleértve a fényforrást és a kondenzátort; ② az objektívekből és szemlencsékből álló optikai nagyítórendszer a mikroszkóp fő része, a gömbi aberráció és a kromatikus aberráció kiküszöbölése érdekében a szemlencsék és az objektívek összetett lencsecsoportból állnak; ③ mechanikus eszköz, az anyag rögzítésére és a kényelem megfigyelésére.
A mikroszkóp tárgyát nem csak a nagyítás határozza meg, hanem a mikroszkóp felbontóképessége (felbontása), a felbontóképesség a mikroszkóp (vagy az emberi szem a célponttól 25 cm-re) képes megkülönböztetni az objektumot kis időközönként a képesség, hogy megkülönböztetni a felbontóképesség nagyságát a fény hullámhossza és a tükör szájsebessége, valamint a közeg törésmutatója határozza meg, a képletben kifejezve:
R=0.61λ /NANA=nsin /2 ahol: n=a közeg törésmutatója;=a tükör szájszöge (minta a feszítési szög objektívlencséjén), NA=tükör szájsebesség (numerikus rekesznyílás). A tükör szájának szöge mindig 180?-nál kisebb legyen, tehát a sina/2 zui értéke szükségszerűen kisebb, mint 1.
Az optikai lencsék gyártásához használt üveg törésmutatója 1,65 ~ 1,78, a használt közeg törésmutatója minél közelebb van az üveghez, annál jobb. Száraz objektívlencsék esetén a levegő, a tükör szájfrekvenciája általában 0.05 ~ 0,95; olajlencse cédrusolajjal, mint médium, tükör szájsebesség közel 1,5 lehet.
A normál fényhullámhossz 400~700 nm, tehát a mikroszkóp felbontóképessége nem lesz kisebb 0,2 μm-nél, az emberi szem felbontóképessége 0,2 mm, tehát a mikroszkóp zui nagyítású általános kialakítása általában 1000X.
Másodszor, lézeres konfokális pásztázó mikroszkóp
Lézeres konfokális pásztázó mikroszkóp (lézer konfokális pásztázó mikroszkóp), pásztázó fényforrásként lézerrel, pontról pontra, vonalról vonalra, felületről felületre gyors pásztázó képalkotás, pásztázó lézer és közös objektív fluoreszcencia gyűjteménye, objektív pásztázó lézeres fókuszpont , hanem az objektumpont pillanatnyi képalkotása is. A lézersugár rövidebb hullámhossza miatt a sugár nagyon finom, így a konfokális lézer pásztázó mikroszkóp nagy felbontású, körülbelül 3-szorosa a hagyományos optikai mikroszkópénak. A rendszer egyszer fókuszál, és a pásztázás a minta egy síkjára korlátozódik. Ha a fókuszmélység nem azonos, akkor a minta különböző mélységű képei nyerhetők, és ezek a képi információk a számítógépben tárolódnak, számítógépes elemzés és szimuláció segítségével megmutathatja a sejtminta háromdimenziós szerkezetét. .
