Biológiai mikroszkópos vizsgálat a szövetblokkok térfogatáról
Biomikroszkópia Napjainkig a jéghideg rögzítés, a fagyasztott ultravékony metszetek és a fagyasztott száraz manipuláció rutin módszerei a szövetek és sejtek röntgensugaras mikromezőinek. A módszer részleteit a következő pontok magyarázzák:
Biológiai mikroszkópok A kondenzátorlencsével ellátott mikroszkópokat fel-le mozgatva mérsékelt fényerő érhető el, vagy a változtatható fénytágító rekesznyílása módosítható a közepes 9b fényerő eléréséhez. Ha napos a fény, a céltávcső megfelelően megemelhető, és a változtatható fény rekesznyílása megfelelően megnövelhető. Ha túl erős a fény, akkor a reflektortükör megfelelő lefelé állítható, a változtatható fény rekeszértéke ugrásszerűen csökkenthető. Ha ebben az esetben is vakítónak érzi magát, akkor kiválaszthatja a megfelelő szűrőt a reflektor alatti konzolban. Ez beszerezhető, hogy elégedett legyen a fényerővel. Természetesen a kondenzátorlencse felső és alsó helyzetének beállításánál változtatható a leolvasási rekesz nagysága és a megfelelő szűrők kiválasztása, vagyis bizonyos gyakorlás és tapasztalat után.
Biológiai mikroszkóp Nagyon fontos kérdés a mintavétel és a sejtek szétválasztása, a fagyasztva szárítás és a gyanta beágyazás (FD) ultrafüzetek fagyasztása után, a fagyasztva szárítás a finom lefutás után a 65 elemi összetétel tartalom minden egyes részének meg kell felelnie. nagyon óvatosan kell kezelni, és nem szabad károsítani a megfigyelendő és elemezni kívánt sejteket. Mivel a röntgensugaras mikroterület elemzés nem csak sok lépésből áll, és a költségek nagyon magasak, ha hosszú idő és több lépéses feldolgozás után az elemzett sejtek sérült vagy elhalt sejtek, ezért rossz következtetéseket vonhatunk le. nagyon sajnálatos. Például a kollagenáz kezeléssel izolált kardiomiocitáknak két morfológiája van, az egyik hosszú rúd alakú, a másik kerek. Ez utóbbiak haldokló sejtek, amelyek a sejtizoláció során károsodtak.
Biomikroszkópia E két típusú cellában az elektrolitok tartalma és eloszlása nagyon eltérő. A kerek szívizomsejtekben a Na nagyon magas és a K nagyon alacsony volt, a mitokondriumokban pedig nagyon magas a ca koncentrációja. Más analitikai módszerekkel végzett ellenőrzések után kiderült, hogy a kerek sejtekben a magas Na és az alacsony K, valamint a mitokondriumokban a magas ca a sejtszétválás során a sejtmembrán károsodásának következménye. A sejtek és szövetek hidegrögzítése gyakran kvench rögzítéssel, majd folyékony nitrogénben való konzerválással történik. A Quench rögzítés fontos a tartósítás hatékonysága szempontjából. Az élő sejtek vagy friss szövetek vízben gazdagok, a kioltás során gyakran a sejtek vagy szövetek és a hideg ágens (különösen folyékony nitrogénnel tiszta hidegen) közvetlenül érintkezik az első fagyasztás-rögzítés részeivel, így "héjat" képeznek, amely megakadályozza a sejt közepén a hidegrögzítést. Ennek eredményeként a röntgensugaras mikrocelluláris elemzés során gyakran találnak jégkristályokat a nagyobb sejtek közepén. Ennek elkerülése érdekében hűtőközegként olyan anyagokat használnak, amelyek olvadáspontja magasabb, mint a folyékony nitrogén, de alacsonyabb, mint a száraz 806 c. Sok ilyen anyag van, de * könnyen beszerezhető, olcsó a koncentrált propán (forráspontja 42,120 °C, olvadáspontja 187,10 °C, molekulatömege 44,1), a hűtési sebessége * gyors. Ennek azonban megvan az a hátránya, hogy gyúlékony.
A biológiai mikroszkóp speciális polcon lévő izomrostra helyezhető, így az izomrost-összehúzódást egy bizonyos időfázis eléréséhez rögzíteni kell, azonnal indítsa el a fúvókát, hogy a folyékony propán az izomrost-sugárba kerüljön, így az izomrost-összehúzódás kioltása. a hideg rögzítette. Ezután az izomrostot a fogasléccel együtt kivesszük és folyékony nitrogénbe helyezzük. Ha rögzíti a vérsejteket vagy izolált sejteket, először alacsony sebességű centrifugálással, hogy a sejtek koncentrálódjanak, a sejtek átkerülnek a jó hővezetőképességű ezüstcsőbe, a csőbe a folyékony propán hasított hidegen rögzítve. Hall laboratóriumi fix patkány hasnyálmirigy, az első két acéldarab folyékony héliummal (vagy folyékony nitrogénnel) előhűtve, befogott bilinccsel a két rézdarab a hasnyálmirigy elé és mögé kerül, úgy, hogy a néni a mirigy kioltó hidegrögzítés. A szövetek vagy sejtek folyékony nitrogénben hosszú ideig tárolhatók a kioltás és rögzítés után.
