Biológiai mikroszkóp a szövetblokkok térfogatára vonatkozóan
Biológiai mikroszkópia Eddig a hidegrögzítés, a fagyasztott ultravékony metszet és a fagyasztva szárítás rutin módszere volt a szövetek és sejtek röntgen-mikrometszetének. A módszer részletei a következők:
Biológiai mikroszkópok. A kondenzátorral ellátott mikroszkópok esetében a kondenzátor fel-le mozgatható a közepes fényerő eléréséhez. Ezenkívül a változtatható fénykibocsátó diódák apertúrája módosítható a mérsékelt 9b fényerő eléréséhez. Ha erős a fény, akkor a kondenzátor megfelelően megemelhető, és a változó fény apertúrája megfelelően megnövelhető. Ha a fény túl erős, a kondenzátor megfelelően leengedhető, és a keresztfénysugár apertúrája megfelelően csökkenthető. Ha ebben a helyzetben továbbra is vakítónak érzi magát, kiválaszthat egy megfelelő szűrőt, és ráhelyezheti a kondenzátor alatti konzolra. Így elérheti az Önt kielégítő fényerőt. Természetesen bizonyos gyakorlásra van szükség ahhoz, hogy tapasztalatot szerezzünk a kondenzátor fel-le helyzetének beállításában a változó rekesznyílás eléréséhez és a megfelelő szűrők kiválasztásához.
A biológiai mikroszkópiában nagyon fontos kérdés, hogy a sejtek gyűjtése és szétválasztása során, fagyasztva szárítás és gyanta beágyazódás (FD), ultravékony pellet fagyasztás után, valamint fagyasztva szárítás után minden rész 65 elemtartalmának kell lennie. nagyon óvatosan kell elemezni, és feltétlenül Ne sértse meg az analizálandó sejteket. Mert a röntgen mikroterület elemzés nemcsak sok lépésből áll, hanem sokba is kerül. Ha hosszú idő és több lépés után az elemzett sejtek sérült vagy elhalt sejtek, akkor kár lenne téves következtetéseket levonni. Például a kollagenáz kezelés után izolált kardiomiocitáknak két alakja van, az egyik hosszú rúd alakú, a másik kerek. Ez utóbbiak haldokló sejtek, amelyek a sejtizoláció során károsodnak.
Biológiai mikroszkópia Az elektrolitok tartalma és eloszlása ebben a két sejttípusban nagyon eltérő. A kerek szívizomsejtekben nagyon magas a Na és nagyon alacsony a K, a lineáris ágakban pedig nagyon magas a Ca-koncentráció. Más elemzési módszerekkel végzett ellenőrzések után bebizonyosodott, hogy a kerek sejtekben a magas Na és alacsony K, a mitokondriumokban pedig a magas ca a sejtszeparációs folyamat során a sejtmembrán károsodásának tulajdonítható. A sejtek és szövetek hidegrögzítési módszere gyakran az, hogy először kioltják és rögzítik, majd folyékony nitrogénben tárolják. Az oltás és a rögzítés nagyon fontos a tartósító hatás szempontjából. Az élő sejtek vagy a friss szövetek vízben gazdagok. Kioltáskor a sejtek vagy szövetek kriogénnel közvetlenül érintkező részei (főleg folyékony nitrogénnel történő lehűtéskor) először lefagyasztják és rögzítik, így "héjat" képeznek, amely akadályozza a sejtek központi része összezúzódott. és hidegen rögzített. Ezért az X-line mikroterület elemzésekor gyakran kiderül, hogy jégkristályok vannak a nagyobb sejtek közepén. Ennek elkerülése érdekében a folyékony nitrogénnél magasabb olvadáspontú, de alacsonyabb -806c szárazságú anyagot használnak zúzott hűtőközegként. Sok ilyen anyag létezik, de a legegyszerűbb és legolcsóbb a tömény propán (forráspont - 42,120c, olvadáspont - 187.10c, molekulatömeg 44,1), és a hűtési sebesség is a leggyorsabb. De hátránya, hogy gyúlékony.
A biológiai mikroszkóp egy speciális keretre helyezheti az izomrostokat. Amikor az izomrostok összehúzódása elér egy bizonyos fázist, és rögzíteni kell, a fúvókát azonnal elindítják, hogy folyékony propánt permetezzenek az izomrostokra, hogy kioltsák és rögzítsék. Ezután az izomrostokat a kerettel együtt kiszedtük és folyékony nitrogénbe helyeztük. Ha a vérsejtek vagy az elválasztott sejtek rögzülnek, először alacsony sebességgel centrifugálja a sejtek koncentrálásához, helyezze át a sejteket egy kis, jó hővezető képességű ezüstcsőbe, helyezze a csövet folyékony propánba, majd fagyassza le a rögzítéshez. A patkány hasnyálmirigy Hall laboratóriumban történő rögzítésekor először hűtse le a két acéltömböt folyékony héliummal (vagy folyékony nitrogénnel), rögzítse fogóval a két réztömböt, és helyezze a hasnyálmirigy elé és után, hogy kioltja és rögzítse a méhmirigyet. . A szövetek vagy sejtek kiolthatók és rögzíthetők, majd folyékony nitrogénbe vihetők át hosszú távú tárolás céljából.
